倒置荧光显微镜

UIS2 光学元件具有最大的信噪比和用于活细胞荧光成像的光学性能 超高的信噪比，能够得到完美的图像 　　崭新的UIS2物镜的信噪比优越，高于现有物镜50%。这种物镜的新特性还包括精选了低自发荧光玻璃（通过全反射鍍膜和连接材料，显著减少了自发荧光），提高了数值孔径，增强了信号亮度。UIS2系统在弱激发光下，能够有效探测极弱荧光，从而建立了活细胞荧光成像的新标准。 高数值孔径物镜，用于荧光成像 　　用于UIS2系统的两种新物镜有：PLAPON60XO，它的数值孔径为1.42，最适合荧光成像；UPLSAPO100XO，适合所有用途。这两种物镜都有很高的荧光信噪比，而且都能够在45mm齐焦距下有非常好的UV激发效果。UPLSAPO100XO能够提供直到340nm的高透过率 拥有更宽波长范围内的高透过率 　　IX2系列的内置物镜采用UW多层鍍膜技术，能够有效消除超宽谱带上的反射，在可见光到近红外光的波长范围内能够实现平坦的高透过率，在近红外和紫外范围内的透过率显著提高。总之，在较宽波长范围内的性能使它非常适合当今最需要的研究用途。 有效消除直到近红外范围的色差 　　最高级的UIS2物镜是UPLSAPO系列，它杰出的超级复消色差特点有效地消除了从可见光谱直到1000nm范围内的色差。这意味着从紫外到红外范围内的成像都可以只用一个物镜实现。这一系列物镜在使用覆盖很宽谱带的荧光进行多色观察时，可以获得出色的清晰图像而不产生颜色偏移。 双层多光口设计保证了输入/输出灵活性 后上光口 后上光口不改变载物台高度，所以不影响镜架稳定性 这一光口可做光路输入口，可装一个附加荧光照明器 右侧光口 右侧光口装置（IX2-RSPC-2:可选件，视场数：16）带有一个结像透镜，可以安装一个C型接口CCD照相机。 后下光口 能够安装冷CCD DP30BW与同类设备。 左侧光口 在这一光口上，原始图像平面距显微镜镜架102mm，具有很大的灵活性，用以安装滤色镜转盘或者超低0.25X或5X照相机适配器。 与双光口视频适配器结合，能够获得两个原始图像。（可选件） 底光口 使用IX2-TVR （T型接口），获得原始图像。 光学设计同时兼容近红外 　　双层结构的内部设计有平行光束的输入输出以及多光口结构，用以获取原始图像。为了让光谱范围尽可能地最大，每层的光路分支都兼容近红外光谱。即使同时使用多个光口，载物台高度也不变化。因此，系统的稳定性和照明性能保持不变。 提高了近***过率 　　IX2系列采用UIS2 光学系统，提高了侧光口、后光口和底光口的***过率，能够提供多方面的高性能，以适应未来研究的需要。 高主机性能 捕捉高清晰度原始图像 　　使用平行光束后，光线可以从后上光口或右侧光口捕捉或传递。由于UIS2光学系统不需要额外补偿（即，补偿只通过物镜透镜进行），所以能够捕捉到清晰的原始图像。* 　　* “原始图像”是指光线通过物镜后聚焦生成的第一个图像。没有光线质量损失，也没有图像变差。 V形光路，降低光线损失 　　为了把反射时的光线损失减少到最小程度，采用了简单的V形光学结构。这种结构将显微镜内部的反射减少到仅仅一次，降低了光线损失，能够观察到非常微弱的荧光信号。 　　热补偿延迟透镜组件：用于观察光路的热补偿延迟光学元件，包含带有不同热特性的组合透镜，能够补偿温度变化造成的模糊 阻止热膨胀，避免模糊的方法 　　外接电源：在长时间段延时观察，环境温度变化或者从空调中吹出的空气将会使显微镜产生一些热形变。由于这种形变会造成模糊，IX2系列设计组对这个问题投入了极大的关注。应对措施包括将透射光照明电源放置到显微镜外部，这就减少了内部产生的热形变，将模糊程度降低到传统模块的七分之一。提供各类附件以稳定长时间段的延时观察，例如恒温培养箱。 镜体小巧，便于操作 　　由于镜体设计小巧，空间足以在显微镜上设计两侧光口，底光口以及后光口，留下的两侧区域足以很方便地安装各类周边设备。使用专用工具，显微镜可以安装到一个防震镜座上，取下显微镜后面的扩展支架后，显得更加小巧玲珑。 无须聚焦的校正环 　　新开发的LUCPLFLN40X（N.A. 0.6, W.D.3.4mm☆）和LUCPLFLN60X（N.A. 0.7, W.D. 1.5---2.2mm）适用于任意厚度的容器。在校正由不同厚度容器所造成的球差时，转动校正环不会使聚焦变模糊。校正操作简单，优化了观察图像。*：使用1mm厚度容器时。 [变倍器] 　　无需更换物镜，就可以在1X和1.6X之间改变放大倍率。可选2X附件。 新的荧光系统 信噪比提高，能够有效检测到非常微弱的荧光 信噪比更高，在荧光观察时，能够输出更明亮、反差更高的图像 　　为了最大程度地减小细胞损伤或荧光衰减，理想的显微镜应该在最小激发光下进行明亮的、高反差的荧光观察。为了有效检测到微弱的荧光信号，必须降低杂散光的噪音。信噪比越高，弱激发光下的观察图像越明亮、越清晰。 增强信号的方法 ①高数值孔径的荧光物镜。 ②与单独荧光波长特性相吻合的滤色片 降低噪声的方法 ①无自发荧光的物镜 ②使用不产生荧光光谱交叠的激发和发射滤色片组合。 ③能阻止杂散光进入的光学系统 ④能减少自发荧光的环形狭缝照明 荧光观察组件 低自发荧光高信噪比物镜 　　①使用人员除了可以选择PLAPON60XO 物镜（出色的数值孔径为1.42）,还可以选用大量的其它高数值孔径的物镜，这类物镜自发荧光小，精选玻璃，有助于提高信噪比。     物镜     数值孔径    工作距离(mm)

 UPLSAPO10X    0.40        3.1mm  UPLSAPO 20X    0.75        0.6mm

UPLSAPO 40X    0.90        0.18mm

UPLSAPO 60XO   1.35        0.15mm

UPLSAPO 100XO  1.40        0.13mm

PLAPON60 XO    1.42        0.15mm

UPLFLN40XO     1.30        0.2mm

LUCPLFLN 20X   0.45       6.6 — 7.8mm

LUCPLFLN 40X   0.60       2.7 — 4mm

LUCPLFLN 60X   0.70       1.5 — 2.2mm  

玻璃反射器捕捉多重染色剂荧光 　　⑥多带分光镜通常用于在激发和吸收一侧使用滤色镜转盘时，获取多重染色荧光样品的多色图像。但这种分光镜会碰上这样一个问题，那就是，由于染色剂数目增加，每种荧光图像都会变暗，这是因为透过光谱变窄，透过率在最好状态下也要降低到90%以下。因此，奥林巴斯公司开发了与波长无关的世界一流的反射器，能够在从430nm到700nm的宽波长范围中具有94%的高透过率。与激发和发射一侧的滤色镜转盘共同使用时，就可以使用多种染色剂，更有效地捕捉荧光图像。☆ 正在申请专利 红外CCD适配器 　　这些低放大倍率CCD适配器安装在左侧光口，覆盖从可见光到近红外光的波长范围。 新的微分干涉（DIC）系统 诺马尔斯基DIC 显微镜的简单原理 　　光线穿过特殊媒介（例如，水 ）中带有不同折射率的物质（例如，细胞）时，会产生相差。诺马尔斯基DIC 利用这种相差增强反差。来自显微镜光源的光的波动方向与起偏器（聚光镜侧）的光一致，当其通过聚光镜侧的DIC 棱镜时，就分为直角正交的两个束光。分裂距离称做裂劈间隙。当这两束光线通过带有不同折射率（例如，细胞）的媒介时，其中一束会发生延迟；而这两束光被DIC 滑板（观察筒侧）和检偏镜重组时，干涉效应就会产生反差。这就是诺马尔斯基DIC 的原理。 奥林巴斯公司已经根据裂劈间隙为各种样品开发出了理想的DIC 棱镜。当DIC 反差低时，样品很难观察，由于有强烈眩光，高反差也会干扰观察。因此，奥林巴斯公司开发了三种不同类型的DIC 棱镜，能够对各种样品进行清晰的观察。 诺马尔斯基DIC系统在活细胞观察中能够提供最佳分辨率或高对比度 　　活细胞样品的厚度从C.elegans之类的线虫到单层细菌细胞之间变化，这就需要DIC也能随高反差的厚样品或几乎不可见的薄细胞而变化。奥林巴斯提供三种DIC 系统，每种的微分间隙都不一样。DIC 棱镜在光通过时，微分间隙越大，则最终图像的反差程度越大。对于厚样品，小断层、高分辨率装置是非常完美的。对于非常薄的样品，带有双倍普通微分间隙的高反差棱镜则非常理想。 根据样品厚度和物镜放大倍数，选择最佳的DIC 棱镜。 新型DIC系统有着广泛的选择 　　可提供大量DIC兼容物镜。每种聚光镜棱镜都适合很多的透镜，安装和配置更加容易。 长工作距离万能聚光镜IX2-LWUCD 　　适合从10X到100X放大倍率下进行DIC观察。 特别是在20X到40X放大倍率下范围内，可以根据样品厚度选用高反差或高分辨率。 浮雕相衬和相差的专用装置 　　浮雕相衬（RC）装置 奥林巴斯浮雕相衬系统能够产生高反差的3D 图像，类似于DIC效果，可用于塑料器皿中的样品。浮雕相衬用于细胞受精，使细胞核膜更容易看到和穿刺。 浮雕相衬装置 ☆ 使每一物镜的阴影方向一致，提高不同倍率下的可操作性。 ☆ 聚光镜（IX2-MLWCD）的长工作距离，以免干扰操作器的工作。 用户可以在两个系列的浮雕相衬物镜中选择：高性价比的消色差物镜或高分辨率、高平场性及更好荧光性能的平场半复消色差物镜。浮雕相衬用的聚光镜（IX2-MLWCD）也适用于DIC和相衬观察。 相差观察（PH）设备 　　超长工作距离聚光镜IX-ULWCD，用于相差和明场观察，工作距离长（73mm），能容下大容器，有着完美的可操作性。应该与4X-40X相差物镜组合使用。相差观察也可以使用IX2-LWUCD 聚光镜进行，它的工作距离是27mm。 IX81-用于活细胞成像的电动操作系统 　　通过PC、控制器或显微镜镜体上的操作钮控制各个功能 IX81功能控制软件IX2-BSW 　　使用IX2-BSW*控制软件，几乎每一项操作功能都可以通过PC、手动开关和显微镜上的操作钮单独或多种组合进行。一些图形分析软件也可以用于控制显微镜操作、图形捕捉和分析。在这种情况下，所有操作可以通过PC进行。 *包括系统控制器IX2-UCB2。 活细胞成像工作站 ——进行活细胞观察时，保持长时间段的稳定性 　　用于延时观察实验的聚焦漂移补偿功能 带有聚焦漂移补偿功能的电动倒置研究级显微镜 这种里程碑意义的显微镜模块很容易再现任何预置的聚焦位置。对于延时观察实验，这种功能减少了对于会导致聚焦模糊的轴叠加图像的需要。还原聚焦位置时，不需要激发光，只需要光毒性较小的785nm激光，因此也就不需要关注荧光衰减。另外，激发光通过它自己的专用光路传递，所以，IX2的全部光路都能用来成像。 无震动高灵敏度冷CCD照相机，用于活细胞成像 　　高灵敏度冷CCD照相机DP30BW 这种照相机通过珀尔帖式冷却系统冷却（恒温5℃）。它内置快门，具有背景消除功能（降低暗电流）能够捕捉到高质量的图像，即使只有微弱的荧光。使用DP-BSW软件，可以记录静态和动态图像。也可以和成像软件结合成为电动装置，能够从2维到6维，例如多重染色、逆卷积法和延时观察实验等方面的应用，驱动许多荧光成像步骤。 >更多DP30BW资料 【链接】 在长时间段观察中能够提高系统稳定性的附件 [CO2培养箱MIU-IBC-I，MIU-IBC-IF] 　　高精度培养箱控制器能够保持实验室培养箱中的环境完全恒定在37℃以下温度，90%湿度和5% CO2浓度（使用CO2 5%浓度容器）。在这种情况下，活细胞的活性可以维持大约两天。另外，采用特殊结构的设备使由热膨胀导致的载物台漂移程度减少到最小。因此，这种培养箱是共聚焦激光扫描显微镜下进行延时观察非常理想的选择。使用顶部加热器上注射孔也能在实验室培养皿中对细胞进行注射。 * 内置载物台加热板 * 物镜加热器 * 5% CO2供应管外径为4mm，内径为2mm，400mm长。 * 在某些地方不能使用。 激光扫描共聚焦系统 / FV1000 FLUOVIEW系统 激光扫描共聚焦显微镜的基本性能是在将样品损伤机率降到最低程度的同时，成像效果明亮：离子沉积镀膜滤片，紧凑光路；快速：256x256加速扫描16f/s；精确：2 nm光谱分辨率，1nm光谱步进，10nm Z轴步进，可以快速获取准确的活组织信息。与（可选的）SIM扫描器同时使用时，FV1000能够实现观察和光激发同步，以便同时进行激光激发和成像。 可以选择两种扫描系统：卓越的光谱性能，高分辨率和精确性的光谱型；优异的性价比，非常适用于生物学观察的滤光片型。 TIRFM全内反射荧光显微镜系统 自1997年以来，奥林巴斯公司全内反射系统的物镜已经成为市场的领导者，奥林巴斯的TIRFM专用物镜能让大约200nm的光通过盖玻片介面进入样品。奥林巴斯公司通过提供3种专用TIRFM 物镜，巩固了这种领导地位，其中包括目前世界最高数值孔径的物镜，即100X，N.A. 1.65的物镜。 由TIRFM 生成的超薄光学层能够提供极高信噪比的图像，一般用于包括气泡轨迹细胞粘附及单分子运动。 奥林巴斯独有的高数值孔径物镜能够很容易地产生一个很浅的照明区域。由于极少光泄露，所以能够获得一个黑色背景上的高反差图像。 圆盘扫描共聚焦显微镜系统 奥林巴斯圆盘扫描共聚焦系统（DSU）使用白色、弧光激发光源和CCD就能提供共聚焦图像。该系统的核心是由奥林巴斯公司独家设计的狭缝结构圆盘，能够提供极佳的光通量和理想的光学断层或“共焦面”的厚度。 ·兼容带有不同光谱特性的各种激光 由于使用了弧光光源，该系统只需要简单地转换标准光镜组件，就可以适合宽广波谱范围的各种荧光应用。 ·将激发光对样品的损伤降到最低 激发光通过圆盘后，强度降低到原来的大约5％。即使这样，从聚焦样品表面发出的荧光也基本无衰减。 ·快速构造3D图像 能够很快成像，只需要0.1-0.4秒（推荐的CCD曝光时间）。成功重叠拍下的正交图像，能够迅速构造3D图像。 ·支持各种放大倍率物镜 五个DSU圆盘支持狭缝间隙及宽度的变化。因此，圆盘可以参照物镜的放大倍率和数值孔径相匹配。DSU支持10×到100×共焦成像。 ·共聚焦圆盘移入移出光路可以通过手动控制器或通过软件进行，所以很容易在DSU和反射光荧光观察间转换。