该光化学衍生器广泛应用于黄曲霉毒素和磺胺类药物的HPLC法检测,它能够增强黄曲霉毒素B1和G1的荧光强度,黄曲霉毒素B1和G1灵敏度能够达到0.1ppb;还能够增强磺胺类药物的荧光强度:磺胺嘧***(Sulfadiazine),磺胺***(Sulfapyridine),磺胺甲基嘧***(Sulfamerazine),磺胺二甲嘧***(Sulfamethazine),磺胺对甲氧嘧***(Sulfamethoxydiazine),磺胺喹噁啉(Sulfaquinoxaline),灵敏度达到10ppb左右。
由美国AURA公司开发研制的光化学衍生器,使用时置于HPLC柱和检测器之间,进行柱后连续光化学衍生反应提高荧光、紫外、电化学检测和化学发光检测器的灵敏度和/或响应的选择性。
该衍生器包括下列组件:带有开关的灯架(Lamp holder with switch),254nm紫外灯,反应池架(Reactor holder),特殊设计的编织的反应网(knitted reactor coils)。该技术已被成功应用于大量的***酸盐、氨基酸、多肽、黄曲霉毒素及磺胺类药物等分析。
应用
1 黄曲霉毒素的检测
由于黄曲霉毒素B1和G1本来具有较强的荧光性,但接触水以后,发生荧光的淬灭现象,荧光性基本消失,很难用液相色谱检测出来,所以我们可以采用衍生的方法使黄曲霉B1和G1的荧光性增强。目前衍生的方法主要有三***衍生法,***衍生法等。三***衍生法,操作步骤繁琐,试验重复性很差,而且三***毒性很强;***衍生法,需要柱后衍生泵,还要配制***衍生液,操作也很繁琐。而本光化学衍生器不需要任何化学试剂,直接连接于色谱柱与荧光检测器之间,操作简单,检测结果准确,灵敏度高。
液相色谱条件
色谱柱:Cloversil-C18 4.6*150mm(5um)或Cloversil-C18 4.6*250mm(5um)
流动相:甲醇-水(45+55,v/v)
流速:0.8mL/min,进样体积:20~100uL
检测器:荧光检测器,激发波长360nm,发射波长440nm
光化学衍生化系统:光化学衍生器(连接于色谱柱后,然后通向荧光检测器)