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操作流程: 1. 实验准备 a) 取出试剂盒样品处理组分,纳米磁珠使用前混匀。 b) 加热块或者水浴80℃预热。 2. 标本处理 每个样本的试剂用量:20µl纳米磁珠(MNP),200µl Washing buffer for MNP,200µl Lysis 20,150µl Binding buffer,200µl Washing buffer ,50µl Elution buffer。 ①核酸的释放与结合: a) 向含有纳米磁珠的离心管中加入200µl Lysis 20,50µl含有病毒的的待检样品,150µl Binding buffer,振荡器上混合均匀。 b) 将离心管取出,自然冷却至室温,不时混匀,室温结合10分钟。 ②磁珠的清洗及核酸的洗脱: a) 用磁铁吸附纳米磁珠,弃掉上清。 b) 向离心管中加入100µl Washing buffer,用移液枪吹打混匀纳米磁珠,用磁铁吸附纳米磁珠,弃掉上清。 c) 向离心管中加入100µl Washing buffer,用移液枪吹打混匀纳米磁珠,用磁铁吸附纳米磁珠,弃掉上清。 d) 向离心管中加入50µl Elution buffer,用移液枪吹打混匀纳米磁珠,于80℃加热5分钟。 e) 将离心管从加热块或者水浴中立即取出,用磁铁吸附纳米磁珠,将上清转移至一无RNA酶污染的离心管中,则上清中含有待检测病毒的核酸。 注: 本操作步骤以50µl样品为例,当样品量多于50µl时,则步骤②核酸的释放与结合中的各试剂用量,等比例增加,样本最大量为1 mL。
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