采用竞争ELISA法。用DHT抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的DHT与包被的DHT竞争生物素标记的抗DHT单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下现蓝色,加终止液后变为黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,DHT浓度与OD450值之间呈反比,通过绘制标准曲线计算出样品中DHT的DHT (Dihydro***) ELISA Kit 中文名称 双氢**(DHT)酶联免疫吸附测定试剂盒 货号 E-EL-0031 种属 General/通用 规格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips) 检测方法 竞争ELISA法 检测范围 39.063000000000002~2500pg/mL 灵敏度 23.437999999999999pg/mL 规格 保存 Micro ELISA Plate 8×12 / 8×6* 4℃ Reference Standard 2/1 支* 4℃ Reference Standard & Sample Diluent 1瓶 20mL/12mL* 4℃ Concentrated Biotinylated Detection Ab 1支 120μL/70μL* 4℃ Biotinytated Detection Ab Diluent 1瓶 10mL/6mL* 4℃ Concentrated HRP Conjugate 1支 120μL/70μL* 4℃(避光) HRP Conjugate Diluent 1瓶 10mL/6mL* 4℃ Concentrated Wash Buffer (25×) 1瓶 30mL/16mL* 4℃ Substrate Reagent 1瓶 10mL/6mL* 4℃(避光) Stop Solution 1瓶 10mL/6mL* 4℃ Plate Sealer 5/3 张* Manual 1 份 Certificate of Analysis 1 份 在各孔中加入标准品或样品各50μL *: [96T/48T] http://www.elabscience.cn/index.php/product/view/aid/25893.jsp
2. 立即在各孔中加入50μL 生物素化抗体工作液
3. 37℃孵育45分钟
4. 洗涤3次
5. 加入100μL酶结合物工作液, 37℃孵育30分钟
6. 洗涤5次
7. 加入90μL底物溶液, 37℃孵育15分钟左右
8. 加入50μL终止液,立即在450nm波长处测量OD值
9. 结果计算