点击图片查看原图

T4 DNA连接酶

产品价格: ¥160.00

最小起订量:暂无 可售数量:999盒

发货时限:
暂无
所在地区:
中国上海
有效期至:
长期有效
最后更新:
2021-04-22 01:30:02
浏览次数:
56

产品详情

品牌名称:
XY-Bioscience
货号: XY05003A
保存条件: 保存温度:4-8 ℃ 保存于20%乙醇溶液中
供应商: 上海信裕生物科技有限公司
保质期: 见说明书
英文名: T4 DNA连接酶
数量: 大量
T4 DNA连接酶

T4 DNA连接酶是ATP依赖的DNA连接酶,催化两条DNA双链上相邻的5′磷酸基和3′羟基之间形成磷酸二酯键。可连接双链DNA的平末端、互补粘性末端及其中的单链切口,也能催化RNA连接到DNA或者双链RNA上,但不催化单链核酸的连接。本产品是经原核表达,柱层析纯化等精制步骤获得的高纯度T4 DNA连接酶,分子量为55.2 kD。适用于DNA片段连接、PCR产物克隆等实验。

来源
纯化自重组 E.coli 菌株,其中携带有编码T4 DNA连接酶的质粒

T4 DNA连接酶质量监测

核酸内切酶和核酸外切酶残留活性检测
将该制品分别与环状质粒DNA和线性DNA片段于37℃保存24小时,DNA带型无变化,测试表明无内切脱氧核糖核酸酶和外切核糖核酸酶活性。
               
单位定义
T4 DNA连接酶在16℃反应温度下,在20 ml体系中反应20分钟,将经HindIII酶切的1 μg λ DNA的95%重新连接起来的酶量定义为0.01 Weiss单位。

T4 DNA连接酶保存条件
-20°C保存,缓冲液最好分装成小份(10次以内)-20°C保存。

T4 DNA连接酶注意事项
1. T4 DNA连接酶对热很敏感,容易因热失活。使用时请放置冰上,用后立即置冰箱中冷冻保存,避免频繁变换温度。
2. 连接反应缓冲液中含有ATP,使用前应在室温融化,然后置于冰上。不要加热融化以免ATP加速降解。将缓冲液分装成小份储存于–20°C 以将ATP 和 DTT 的降解程度降到最低是一种推荐的保存方式;应避免将缓冲液长时间保存在4°C及以上温度。
3. 连接反应缓冲液中的 DTT 经冷冻后可能形成沉淀,可以将缓冲液震荡混合直到沉淀溶解。沉淀溶解后,不影响连接酶的性能。
4. 如果需要在连接反应后灭活T4 DNA连接酶,可将连接反应混合物置于65℃孵育10分钟或70℃加热5分钟即可使酶失活。
5. T4 DNA连接酶在较广的温度范围和连接时间条件下都能取得较好的连接效果,其最适反应温度是25°C。但因片段末端碱基组成不同,突出的碱基数目各异,退火所需要的温度也必然会有差异,因此,最适连接温度通常需要在T4 DNA连接酶的最适反应温度和保证片段充分退火之间求得平衡。短双链 (少于16个碱基的接头) 因自身融解温度(Tm)低需要的连接温度也较低。通常,低温连接需要较长的反应时间。平端连接一般在15–20°C 进行4–18 小时效果较好,而粘性末端在室温(22°C)反应 3 小时或 4–8°C 过夜反应较好。
6. 在连接反应中添加聚乙二醇(PEG)能促进连接反应,尤其是平末端的连接。但该促进效果受PEG质量的影响较大。
7. 反应体系中大于150 mM的NaCl可能抑制50%的连接活性,所以需要注意让盐浓度控制在合适范围内。0.2 M K+、Cs+、Li+、NH4+以及1 mM精胺都对连接酶的活性有不同程度的抑制,所以也需要引起重视。

产品目录
 货号  产品名称  规格  报价(元)
 XY05003S  T4 DNA连接酶  4, 000 U,400 U/μl  50
 XY05003A  T4 DNA连接酶  40, 000 U,400 U/μl  160
 XY05003B  T4 DNA连接酶  200, 000 U,400 U/μl  500
温馨提示:不可用于临床治疗。

免责声明

本网页所展示的有关【T4 DNA连接酶】的信息/图片/参数等由的会员【上海信裕生物科技有限公司 】提供,由【生物实验采购网】会员【上海信裕生物科技有限公司 】自行对信息/图片/参数等的真实性、准确性和合法性负责,本平台(本网站)仅提供展示服务,请谨慎交易,因交易而产生的法 律关系及法律纠纷由您自行协商解决,本平台(本网站)对此不承担任何责任。您在本网页可以浏览【T4 DNA连接酶】有关的信息/图片/价格等及提供 【T4 DNA连接酶】的商家公司简介、联系方式等信息。

在您的合法权益受到侵害时,请您致电,我们将竭诚为您服务,感谢您对【生物实验采购网】的关注与支持!

网站首页 | 关于我们 | 联系方式 | 使用协议 | 版权隐私 | 网站地图  |  排名推广  |  广告服务  |  积分换礼  |  网站留言  |  RSS订阅  |  违规举报
 
免责声明:本站有部分内容来自互联网,如无意中侵犯了某个媒体 、公司 、企业或个人等的知识产权,请来电或致函告之,本网站将在规定时间内给予删除等相关处理。