货号: | BTR211Q |
供应商: | 北京博尔西科技有限公司 |
数量: | 大量 |
英文名: | Strep-Tactin Sepharose FF |
保质期: | 3年 |
保存条件: | 20%乙醇4-8℃保存 |
规格: | 10ml |
(Strep-Tactin Sepharose FF)
1.产品介绍
Strep-Tactin琼脂糖凝胶FF 是一种将Strep-Tactin 键合在琼脂糖凝胶微球上形成的生物亲和层析分离介质,主要用于纯化Strep II 标签蛋白。Strep II 标签为8 个氨基酸的小标签(WSHPQFEK),由于标签小,仅为1kDa 左右,一般不影响融合后蛋白质的结构和功能,常用于融合表达蛋白质的检测和纯化。
本产品的配基Strep-Tactin 是链霉亲和素(Streptavidin)的突变体,与链霉亲和素相比,Strep-Tactin 对Strep II 标签的亲和能力至少强10 倍以上,能够在温和的条件下与Strep II 融合蛋白结合和解离。由于Strep-Tacin 对Strep II 标签具有高度特异性,一般一步纯化就能获得高纯度的蛋白质样品。
Strep II 标签蛋白与凝胶结合后可使用脱硫生物素竞争方式进行洗脱,该洗脱方式比较温和,一般不会影响蛋白质的性质。如蛋白质能耐受一定的碱,也可用碱液洗脱,比如10mM NaOH 等。Strep-Tactin 琼脂糖凝胶FF 能耐受较高的碱清洗,可以用0.5M NaOH 进行再生清洗和去除热源等。另外,2-(4-羟基苯唑)苯甲酸(HABA)也可用于凝胶再生,过量的HABA 能够竞争下脱硫生物素,并且在无HABA 的缓冲液中,能将凝胶上的HABA 洗脱。
2.规格
1ml(预装柱)、5ml(预装柱)、10ml(预装柱)、20ml、100ml、500ml
3.产品性能
性能 | 指标 |
基质 | 6%琼脂糖微球 |
配基 | Strep-Tactin |
配基密度 | ≥5mg/ml |
载量 | ≥6mg/ml Strep II标签蛋白 |
粒径 | 45-165μm |
推荐流速/最大流速 | 20-100/700 cm/h |
耐反压 | 0.3MPa |
pH稳定范围:短时间/长时间 | 2~13/4~11 |
储存缓冲液 | 20%乙醇 |
储存温度 | 4-8℃ |
①推荐缓冲液
纯化Strep II 标签蛋白
结合缓冲液:100mM Tris-HCl,150mM NaCl,1mM EDTA,pH8.0;
或20mM NaH2PO4,280mM NaCl,6mM KCl,pH7.4
洗脱缓冲液:结合缓冲液+ 2.5mM 脱硫生物素;
或10mM NaOH
再生缓冲液:0.5M NaOH;
或结合缓冲液+1mM HABA
②样品准备
上柱的样品应尽量保持与结合缓冲液一致。通常可用透析、超滤、稀释等方法处
理样品。并且上柱前应过0.45μm 滤膜或高速离心去除不溶物。
③样品纯化
(1)平衡:取适量的Strep-Tactin 琼脂糖凝胶FF 装入合适的层析柱中,用蒸馏
水清洗5 个柱体积去除保存液,再用结合缓冲液平衡5 个柱体积,建议流速为100cm/h。
(2)上样:将准备好的样品上柱,建议流速为20-100cm/h,可根据实际结合情
况选择流速,能获得较好的效果。
(3)再平衡:上样后用结合缓冲液平衡10 个柱体积以上,或平衡至基线,洗去
杂质,推荐流速为100cm/h。
(4)洗脱:用洗脱缓冲液洗10-20 个柱体积,建议流速为100cm/h,收集的洗脱
液应立即调节pH 至稳定范围,并根据需要置换缓冲液。
(5)NaOH 再生:洗脱目的蛋白后的柱子用蒸馏水清洗3-5 个柱体积,并用0.5M
NaOH 再生3-5 个柱体积,再用蒸馏水清洗至中性,用20%乙醇保存柱子,或进行下
一次纯化。
(6)HABA 再生:用脱硫生物素洗脱目的蛋白的,还可以用HABA 缓冲液再生,
一般用HABA 的结合缓冲液洗15 个柱体积,再用结合缓冲液洗30 个柱体积,然后可
以用20%乙醇保存柱子,或进行下一步纯化。HABA 上柱后凝胶颜色会变为红橙色,
在结合缓冲液平衡后会恢复正常的白色,这种再生方式一般使用体积会大些。
5. 注意事项:
1) 使用时保证柱子和缓冲液的温度一致,避免柱床内产生气泡,影响纯化效果。
2) 本产品保存条件为20%乙醇,4~8℃。
3) 2-25℃,常压,避光运输
4)仅供科研实验使用
层析柱(预装柱)填料目录:
亲和层析填料(预装柱)
★蛋白A琼脂糖凝胶 FF (Portein A Sepharose FF)
★蛋白G琼脂糖凝胶 FF (Portein G Sepharose FF)
★耐碱蛋白A琼脂糖凝胶 FF (rat-Portein A Sepharose FF)
★蛋白A蛋白G琼脂糖凝胶 FF (Portein AG Sepharose FF)
★镍-琼脂糖凝胶FF (Ni-Sepharose FF)
★链霉亲和素琼脂糖凝胶 FF (Streptavidin Sepharose FF)
★Strep-Tactin琼脂糖凝胶 FF (Strep-Tactin Sepharose FF) (StrepII标签蛋白纯化)
内毒素清除琼脂糖凝胶 (Endotoxin Removal Reagent Sepharose)
GST-琼脂糖凝胶FF (GST Sepharose FF)
钴-琼脂糖凝胶FF (Co-Sepharose FF)
肝素-琼脂糖凝胶 FF (Heparin-Sepharose FF)
大豆胰蛋白酶抑制剂琼脂糖凝胶 FF (STI-Sepharose FF)
重组人源血管内皮生长因子亲和琼脂糖凝胶 FF (rh-VEGF Sepharose FF)
重组人碱性成纤维细胞生长因子亲和琼脂糖凝胶 FF (rh-bFGF Sepharose FF)
人血清白蛋白琼脂糖凝胶 FF (HSA Sepharose FF)
NHS-琼脂糖凝胶 FF (NHS Activated Sepharose FF)
环氧-琼脂糖凝胶 FF ( Epoxy Activated Sepharose FF)
离子交换层析填料(预装柱)
DEAE-琼脂糖凝胶 FF(DEAE Sepharose FF)
Q-琼脂糖凝胶FF(Q Sepharose FF)
CM-琼脂糖凝胶FF(CM Sepharose FF)
SP-琼脂糖凝胶FF(SP Sepharose FF)
疏水层析填料(预装柱)
苯基-琼脂糖凝胶 FF(Phenyl Sepharose FF)
辛基-琼脂糖凝胶 FF(Octyl Sepharose FF)
丁基-琼脂糖凝胶 FF(Butyl Sepharose FF)
凝胶过滤层析填料(预装柱)
型号 | 分离范围 |
琼葡糖凝胶G10 | <700 |
琼葡糖凝胶 G15 | 100-1500 |
琼葡糖凝胶 G25 (脱盐柱) | 1000-5000 |
琼葡糖凝胶 G50 | 1000-30000 |
琼葡糖凝胶 G75 | 3000-80000 |
琼葡糖凝胶 G100 | 4000-120000 |
琼葡糖凝胶 G150 | 5000-300000 |
琼葡糖凝胶 G200 | 5000-600000 |
北京博尔西科技有限公司
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