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大肠杆菌HMS174(DE3)菌种

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1970-01-01 08:00:00
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 大肠杆菌HMS174(DE3)菌种的来源、传代、分离复壮、使用和鉴定等均应该做好详细记录。包括菌种时间、名称、菌号、代数、保存方式、分离复壮方式、使用内容、鉴定情况等。

 

菌种保藏由于影响因素过多,细胞/组织培养中出现的一些问题往往很难分析并得到解决,因此被人戏称为“黑色艺术”或“巫术”。本文列举了一些动物细胞/组织培养中常见的问题及解决方法。      

1. 大肠杆菌HMS174(DE3)菌种培养试剂的保存:

   血清:-5oC - -20oC 保存,避免反复冻融。

   培养基:  2oC – 8oC避光保存。

   完全培养基: 2oC – 8oC避光保存,并在2周内用完。

   尽量缩短血清和培养基见光的时间

 2.液体培养基中谷氨酰胺使用方法:

很多细胞生长要求在培养液中添加谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应置于-20◦C冰冻保存,用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4◦C 冰箱储存两周以上时,应重新加入原来量的谷氨酰胺。大肠杆菌HMS174(DE3)菌种另一种选择是使用L-谷氨酰胺的衍生物 - L-alanyl-L-glutamine dipeptide(如GenDepot的产品Glutaplex配方中含有的成分之一) 替代L-谷氨酰胺。Glutaplex与L-谷氨酰胺相比更加稳定,降解比较慢,提高细胞的存活和生长,极大降低对细胞有毒性的氨的积累。

3.培养基中是否应加酚红:

 大肠杆菌HMS174(DE3)菌种酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂,中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时紫色。研究表明,酚红可以模拟固醇类***的作用,特别是雌***。为避免固醇类反应,培养细胞尤其是哺乳类细胞时,应使用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测,一些研究人员在做流式细胞检测时不使用加酚红的培养基。EC756RECS大鼠软骨肉瘤细胞大鼠EMEM贴壁

EC807RL人B细胞非霍奇金淋巴瘤细胞1640悬浮

EC757DECS人树突状细胞DMEM贴壁

EC7583LL小鼠肺癌细胞小鼠DMEM贴壁+悬浮

EC769VMM5A人黑色素瘤细胞1640贴壁

EC770VMM39人黑色素瘤细胞1640贴壁

EC759A10大鼠主动脉平滑肌细胞大鼠DMEM贴壁

EC771SNU449人肝癌细胞1640贴壁

EC808HUEC人尿道上皮细胞1640贴壁

EC772HHFK人毛囊角质细胞IMDM贴壁

EC809ECEL鸡胚肝细胞DMEM贴壁

EC773JS1小鼠肝星形细胞小鼠DMEM贴壁

EC781ECattle EChondroECytes牛软骨细胞DMEM/F12贴壁

EC780BMEEC大鼠脑微血管内皮细胞大鼠DMEM贴壁

EC823OECI-AML5人急性髓细胞性白血病细胞IMDM悬浮

EC810HBSMEC人支气管平滑肌细胞DMEM贴壁

EC774SDBMSECSD大鼠骨髓间充质干细胞大鼠DMEM贴壁

EC775SNB19人胶质母细胞瘤细胞DMEM贴壁

EC776SK-LU-1人低分化肺腺癌EMEM贴壁

EC777NECI-H647人非小细胞肺癌细胞1640贴壁

EC778HAEEC人主动脉内皮细胞1640贴壁

EC811WRL68人正常肝细胞1640贴壁

EC782U266B1人外周血B淋巴细胞1640悬浮

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