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M-MuLV反转录试剂盒

产品价格: ¥1580.00

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全国
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长期有效
最后更新:
1970-01-01 08:00:00
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产品详情

品牌名称:

 

M-MuLV反转录试剂盒

产品说明
         本公司生产的莫洛尼氏鼠白血病病毒(M-MuLV)逆转录酶是一种RNA介导的DNA聚合酶。该酶能以RNA(合成cDNA时)或单链DNA做模板,由引物起始合成一条互补的DNA。         本试剂盒含有1st Strand cDNA合成所需的全部试剂。合成的1st Strand cDNA可广泛用于2nd Strand合成、杂交、PCR扩增、Real Time PCR反应等。
本产品含有1st Strand cDNA合成所需的全部试剂,可用于如下方面:⑴1st-Stand cDNA的合成;⑵cDNA Probe的制备;⑶RT-PCR反应以及Real Time RT-PCR反应。
M-MuLV 逆转录酶(100 U/μl)    200 μl5× M-MuLV 逆转录酶buffer    1 mlOligo(dT)18 Primer(50 μM)    200 μldNTP Mixture(各10 mM)    200 μlRNase Inhibitor(40 U/μl)    200 μlDEPC-H2O    1 ml×4 
保存温度:-20 ℃(避免反复冻融)有效日期:12个月
建立20 μl 的反应体系可以用于逆转录500 ng~5 μg总RNA或1 ng~500 ng mRNA。1   将以下组分加入无核酸酶的微量离心管中:
Oligo(dT)18 Primer 1 μl
模板RNA 适量
dNTP Mixture 1 μl
DEPC-H2O Up to 10 μl
 2     轻柔混匀。65 ℃加热5分钟后迅速置于冰上冷却。短暂离心后加入以下组分:
5× M-MuLV 逆转录酶buffer 4 μl
M-MuLV 逆转录酶 1 μl 
RNase Inhibitor 1 μl 
DEPC-H2O Up to 20 μl
 3     缓慢混匀。37 ℃反应60分钟。4    在70 ℃加热15分钟使逆转录酶失活以终止反应。5     cDNA产物可以直接作为PCR的模板。如果扩增的PCR产物大于1 kb,则需要去除与cDNA互补的RNA。可以使用1 μl的E.coli RNase H在37 ℃孵育20分钟以去除与cDNA互补的RNA

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