点击图片查看原图
斑马鱼微视行为分析系统
课题整体方案合作平台
Inactive p42 MAP Kinase (Erk2)
胶体金标记的小鼠抗大
Alexa Fluor 647标记
Alexa Fluor 488标记
PE标记的兔抗狗IgG
Cy5.5标记的兔抗豚鼠I
Cy5.5标记的兔抗牛IgM
PE-Cy3标记的羊抗豚鼠
PE标记的小鼠抗羊IgG大肠杆菌BL21(DE3)plysS菌种的来源、传代、分离复壮、使用和鉴定等均应该做好详细记录。包括菌种时间、名称、菌号、代数、保存方式、分离复壮方式、使用内容、鉴定情况等。
菌种保藏由于影响因素过多，细胞/组织培养中出现的一些问题往往很难分析并得到解决，因此被人戏称为“黑色艺术”或“巫术”。本文列举了一些动物细胞/组织培养中常见的问题及解决方法。
1. 大肠杆菌BL21(DE3)plysS菌种培养试剂的保存：
血清：-5oC - -20oC 保存，避免反复冻融。
培养基: 2oC – 8oC避光保存。
完全培养基: 2oC – 8oC避光保存，并在2周内用完。
尽量缩短血清和培养基见光的时间
2.液体培养基中谷氨酰胺使用方法：
很多细胞生长要求在培养液中添加谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置于-20◦C冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4◦C 冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷氨酰胺。大肠杆菌BL21(DE3)plysS菌种另一种选择是使用L-谷氨酰胺的衍生物 - L-alanyl-L-glutamine dipeptide（如GenDepot的产品Glutaplex配方中含有的成分之一） 替代L-谷氨酰胺。Glutaplex与L-谷氨酰胺相比更加稳定，降解比较慢，提高细胞的存活和生长，极大降低对细胞有毒性的氨的积累。
3.培养基中是否应加酚红：
大肠杆菌BL21(DE3)plysS菌种酚红在培养基中被用来作为pH值的指示剂，中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时紫色。研究表明，酚红可以模拟固醇类***的作用，特别是雌***。为避免固醇类反应，培养细胞尤其是哺乳类细胞时，应使用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测，一些研究人员在做流式细胞检测时不使用加酚红的培养基。
EC327MECA38小鼠结肠癌细胞小鼠F12贴壁
EC337SMEC-1人胸膜间皮瘤细胞人DMEM贴壁
EC347MEEC-1人粘液表皮样癌细胞人DMEM贴壁
EC338Beas-2B人正常肺上皮细胞人DMEM贴壁
HOEEC人口腔上皮人无
EC339HGF-1人牙龈成纤维细胞人DMEM贴壁
HEC-a人关节骨细胞人无
GT1-1小鼠垂体小鼠无
MMQ大鼠垂体大鼠无
SM9胎盘细胞无
EC371HKF人成纤维细胞人DMEM贴壁
EC343ECECEC-HSF-1***肤纤维细胞人EMEM贴壁
EC344TU686人喉癌细胞人IMDM贴壁
EC351MKN1人胃癌细胞人1640贴壁
EC356sup-B15 人Ph+急淋白血病细胞人IMDM悬浮
EC352SK MEL5 ***肤黑色素瘤细胞人DMEM贴壁
EC354MLM 小鼠急性粒白血病细胞小鼠1640悬浮
EC355EJ 人 膀胱癌人1640贴壁
EC359BV2 小鼠小胶质细胞小鼠DMEM贴壁+悬浮
EC357N9 小鼠小胶质细胞小鼠DMEM贴壁
EC358BECPAP 甲状腺乳头状癌细胞人F12K贴壁
