禽流感H7亚型抗体检测卡
禽流感H7亚型抗体检测卡使用说明书
(胶体金法)
【产品名称】
通用名:禽流感H7亚型抗体检测卡(胶体金法)
英文名:Test Kit for Antibodies to Avian Influenza Virus H7(GICA)
【包装规格】 50T/盒、25T/盒
【预期用途】 禽流感又名真性鸡瘟或欧洲鸡瘟,是由A型禽流感病毒(Avian Influenza Virus,AIV)引起的禽类的一种急性、高度致死性传染病,以急性败血性死亡到无症状带毒为特征。
本试剂用于检测禽类血清中禽流感H7亚型抗体,可用于免疫效果评价、辅助诊断等。
【原 理】
本试剂采用竞争性胶体金免疫层析试验(GICA)原理制成,对于H7亚型的禽流感病毒抗体有很好的敏感性。样本加入到加样孔后与AIV抗原、胶体金标记物一起沿层析膜移动,若样本中存在AIV-H7抗体则与胶体金标记物竞争AIV抗原,使检测线不显示紫红色,若样本中不存在AIV-H7抗体则产生颜色反应。
【试剂盒组成】
序号 | 名称 | 50T/盒 | 25T/盒 |
1. | 检测卡(含吸管) | 50个 | 25个 |
2. | 缓冲液 | 1瓶 | 1瓶 |
3. | 说明书 | 1份 | 1份 |
【储存及有效期】 储存于阴凉干燥处(2-30℃),有效期24个月。
【样本准备】
血清:按常规方法抽取2-3ml血液置洁净干燥的试管中,静置约1小时待血液凝固后于4000转/分钟离心10分钟(也可将血液静置约2小时,待血液凝固自然析出血清),分离血清。要求血清清亮,无溶血、无污染。血清样本短期可于2~8℃保存,长期需置-20℃保存。
全血:可采用加抗凝剂的全血作为检测样本(全血样本不能冷冻)。
【试验方法】
1.撕开检测卡铝箔包装袋,取出检测卡,放于平整、洁净的台面上。
2.用配套吸管吸取已准备好的样本,垂直而缓慢的滴加1滴(约25ul)到加样孔内(此时观察孔内没有液体流出)。
3.等待10分钟后用装有缓冲液的滴瓶滴加两滴(约60ul)缓冲液到加样孔。
4.室温下放置10-15分钟判断结果,超过30分钟的结果无效。
注意,过量加入样本或缓冲液会出现错误结果。
【结果判断】
1.阴性:在观察孔内,检测线区(T)及对照线区(C)同时出现紫红色线。意味着抗体水平低于HI滴度1:16。
2.阳性:在观察孔内,只有对照线区(C)出现一条紫红色线。意味着抗体水平等于或高于HI滴度1:32。
3.失效:在观察孔内,对照线区(C)不出现色线。
本试剂的检测阈值是HI试验1:32。所以通过对被检血清进行倍比稀释,找到其呈现阳性的最大稀释倍数,则可以得出抗体滴度。例如:将待检血清用生理盐水分别做1:2(一份血清加一份生理盐水,往后依次类推)、1:4、1:8稀释,然后将3份不同稀释倍数样本分别进行检测,如1:2、1:4都呈阳性,而1:8呈阴性,则呈现阳性的最大稀释倍数为1:4,那么此份样本的最终抗体滴度为25(1:32)乘以22(1:4)等于27(1:128)。
【试验结果的解释】
对于免疫后的样本,抗体水平的高低反映了免疫效果的高低。对于未经免疫的样本,阳性结果表明可能有AIV-H7感染,需结合临床及其他方法进行分析。
【试验方法的局限性】
该试验仅用于检测AIV-H7抗体水平。
【注意事项】
1.试验前请仔细阅读说明书,本产品提供的各种试剂仅供本实验用。
2.过期或铝箔袋破损的产品,均不可使用。
3.检测卡从冰箱中取出时应恢复到室温后打开,打开的检测卡应尽快使用以免受潮后失效。
4.去离子水、自来水、生理盐水不能作为阴性对照。
5.待检样本应新鲜清亮,避免使用污染浑浊、严重溶血、大量血脂、异常粘稠的样本。
6.避免接触检测卡上加样孔和检测窗处的层析膜。
7.试验的废弃物应视为污染物,并按当地相关规定妥善处理。