产品信息
产品描述
溴化乙锭,英文名Ethidium bromide,缩写EB,一种DNA嵌入剂,可插入DNA/RNA中,其插入双链RNA、双链DNA后荧光强度分别增强21倍、25倍,因此在低浓度(10μg/ml)染色后无需脱色,是分子生物学常用的一种核酸染料、移码诱变剂、DNA/RNA酶抑制剂。溴化乙锭已用于核酸的许多荧光分析,还可结合到单链 DNA(虽然强度不高)和三链 DNA 上。另外,EB可与吖***橙结合用于区分存活的、凋亡和坏死的细胞。
本品为粉末状EB,可配制成10mg/ml的储存液。用于电泳检测时,工作浓度为 0.5μg/ml。
产品性质
运输和保存方法
室温运输。室温避光保存。有效期4年。
使用方法
一、胶染法(电泳前染色)
1. 制胶时加入EB 核酸染料使其工作浓度0.5μg/ml(每50mL 琼脂糖溶液中加入2.5μL 10mg/ml EB水溶液)。
2. 按照常规方法进行电泳。
注意事项
1) 此方法比较节省染料,250 μL(10mg/ml)染料大约可以做100块 50mL的胶。
2) EB兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
3) 胶染法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。
4) 在染料的存在下,线状双链DNA的迁移率减小了15%。
二、泡染法(电泳后染色)
1. 按照常规方法进行电泳。
2. 室温下将电泳后的凝胶在含有EtBr (0.5ug/ml)的电泳缓冲液或水中浸泡30-45min。
3. (可选)对于检测较小量DNA(<10ng),可将EB染色后的凝胶于水或1mM MgSO4 中室温脱色20min,从而降低因未结合EB引起的背景荧光信号。
特别注意事项
1) 由于EB具有强诱变性,操作时一定要小心避免直接接触皮肤。实验结束后,应对含EB的溶液进行净化处理再行弃置,以避免污染环境和危害人体健康;
2) 关于核酸染料替代产品的选择:
如果您使用紫外成像仪,建议选择YeaRed(Cat#10202ES76)-EB核酸染料的无毒替代品,具有同EB相同的光谱特性;如果您使用激光成像仪或希望在可见光下观测,请选择YeaGreen(Cat#10204ES76),在凝胶染色中是SYBR Green I的完美替代品,安全无毒。
3) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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