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G1440 普鲁士蓝染色试剂盒(核固红法) 2×50ml

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北京索莱宝科技有限公司  张净花  010-56371217

北京索莱宝科技有限公司  张净花  13426459985

Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd 

http://solarbio.bioon.com.cn/

一、产品简介:

含铁血黄素(Hemosiderin)是一种血红蛋白源性色素,为金黄色或棕黄色颗粒,因其

含铁、金黄色,故称为含铁血黄素。当红细胞被巨噬细胞吞噬后,在溶酶体酶的作用下,血

红蛋白被分解为不含铁的橙色血质和含铁的含铁血黄素。

Perls 普鲁士蓝反应(Prussian blue reaction)又称为含铁血黄素染色,即经过亚铁*化

钾和稀酸处理后可以产生蓝色,常见于吞噬细胞内会间质内,主要显示三价铁盐。Perls 普

鲁士蓝是非常经典的组织化学反应,是显示组织内三价铁的一种敏感、传统优良的方法,其

染色原理为:亚铁*化钾溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来,三价铁与亚铁*

化钾反应,生成一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁*化物普鲁士蓝,所以该反应被称

为普鲁士蓝反应。三价铁的亚铁*化物是一种很稳定的化合物,在反应后可用红色染色剂进

行复染,如核固红、伊红、中性红等。

Perls stain 常用于显示局部组织内各种出血性病变,常见于吞噬细胞内。在判断含铁血

黄素沉积时,用Perls 反应可以得到证实,该染色方法可以很好的区分含铁血黄素和其他色

素。该染色液稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀、应用范围广、可以进行复染。该染

色液的复染液采用核固红,是*经典、*常用的复染液。

二、产品组成

三、操作步骤(仅供参考)

(一)石蜡切片染色

1、 组织固定于10%中性福尔马林,常规脱水包埋。

2、切片厚度4um,常规脱蜡至水。

3、蒸馏水水洗1min。

Solarbio

Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd

Tel: 010-56371207

Fax: 010-56371281/82

Http://www.solarbio.cn

4、切片入Perls stain(见注意事项4),浸染15-30min。

5、蒸馏水充分冲洗2-5min。

6、入核固红染色液,淡染细胞核5-10min。

7、自来水冲洗1-5s。

8、常规脱水透明,中性树胶封固。

(二)冰冻切片染色

1、 无需脱蜡,直接迅速用蒸馏水冲洗2~3min。

2、 染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤。

(三)细胞染色

1、4%多聚甲醛固定10~20min。

2、自来水冲洗2 次,每次2min。

3、蒸馏水冲洗2 次,每次2min。

4、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤。

染色结果:

含铁血黄素或三价铁 蓝色

细胞核、其他组织 红色

阴性对照(可选)

取相同连续切片脱蜡至水。置于5%的草酸中,孵育2-6h 后,经Perla stain,需要步骤同上。结果为阴性。

四、注意事项:

1、 切片脱蜡应尽量干净。

2、 组织固定常采用10%的中性福尔马林,经普通福尔马林长期固定后,组织会有损伤。避

免使用酸性固定剂,酪酸盐处理也会妨碍铁的保存。

3、 整个操作过程中容器要干净,避免使用金属铁制品,洗切片和容器时以蒸馏水为宜,因

普通水内含铁质。

4、 Perls stain 染色时,应根据样本情况调整着色时间。

5、 所有检查切片都应使用同一个阳性对照切片,选择适合的对照非常重要.尸检肺组织是一

个很好的对照,包含相当数量的铁阳性巨噬细胞(心衰细胞).

6、 系列乙醇应经常更换新液。

7、 冰冻切片和细胞的染色,*好根据具体情况摸索实验条件.

8、 为了您的健康和安全,请穿实验服并戴一次性手套操作.

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