点击图片查看原图

乙醇酸氧化酶测定试剂盒 UV板 微量法

产品价格: ¥1940.00

最小起订量:暂无 可售数量:暂无

发货时限:
暂无
所在地区:
全国
有效期至:
长期有效
最后更新:
1970-01-01 08:00:00
浏览次数:
60

产品详情

品牌名称:

产品内容:

提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:液体15mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加5mL双蒸水充分溶解。用不完的试剂-20保持,禁止反复冻融。

试剂三:液体2mL×1瓶,4℃保存。

产品说明:

乙醇酸氧化酶(EC1.1.3.15)是植物光呼吸代谢中的关键酶,也是光下合成草酸的关键酶,它催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,对研究光呼吸代谢过程及其调控具有重要意义。

乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,乙醛酸和盐酸***肼反应生成乙醛酸***腙,在324nm 有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器

天平、低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪微量石英比色皿/96孔板(UV板)。操作步骤:

一、酶液提取

按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例(建议称取约0.1g 组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。12000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

二、测定操作

 

测定管

 样本(μL

10

试剂一(μL

130

试剂二(μL

40 

试剂三(μL

20

充分混匀,立即于1mL 石英比色皿中测定324nm 10s190s 吸光值A1 A2△A=A2- A1

三、计算公式:

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1) 按照样本蛋白浓度计算

酶活单位定义:每毫克蛋白每分钟氧化1 nmol 乙醇酸所需的酶量为一个酶活力单位。

GO活性(nmol/min /mg prot= ΔA÷ε×d×V反总÷(V×Cpr) ÷T=392×ΔA÷Cpr

2)按照样本质量计算

酶活单位定义:每克组织每分钟氧化1 nmol 乙醇酸所需的酶量为一个酶活力单位。

GOnmol/min /g= ΔA÷ε×d×V反总÷(W ×V÷V样总) ÷T= 392×ΔA÷W

ε:乙醛酸***腙毫摩尔消光系数:17L/mmol/cmd:比色皿光径,1cmV 反总:反应总体积,0.2V 样:反应中样本体积,0.01LV 样总:加入提取液体积,1mLCpr:样本蛋白浓度,mg/mLW,样本质量,gT:反应时间,3min

b. 96孔板测定的计算公式如下:

(1) 按照样本蛋白浓度计算

酶活单位定义:每毫克蛋白每分钟氧化1 nmol 乙醇酸所需的酶量为一个酶活力单位。

GO活性(nmol/min /mg prot= ΔA÷ε×d×V反总÷(V×Cpr) ÷T=784×ΔA÷Cpr

2)按照样本质量计算

酶活单位定义:每克组织每分钟氧化1 nmol 乙醇酸所需的酶量为一个酶活力单位。

GOnmol/min /g= ΔA÷ε×d×V反总÷(W ×V÷V样总) ÷T= 784×ΔA÷W

ε:乙醛酸***腙毫摩尔消光系数:17L/mmol/cmd:比色皿光径,0.5cmV 反总:反应总体积,0.2V 样:反应中样本体积,0.01LV 样总:加入提取液体积,1mLCpr:样本蛋白浓度,mg/mLW,样本质量,gT:反应时间,3min

注意事项:

1. 测定之前进行预实验,若吸光值较高,请将样品用提取液进行适当的稀释再测定,并在计算公式中乘以稀释倍数。

2. 色素含量较高的样品,可在提取酶时加活性炭吸附。

 

 

免责声明

本网页所展示的有关【乙醇酸氧化酶测定试剂盒 UV板 微量法】的信息/图片/参数等由的会员【 】提供,由【生物实验采购网】会员【 】自行对信息/图片/参数等的真实性、准确性和合法性负责,本平台(本网站)仅提供展示服务,请谨慎交易,因交易而产生的法 律关系及法律纠纷由您自行协商解决,本平台(本网站)对此不承担任何责任。您在本网页可以浏览【乙醇酸氧化酶测定试剂盒 UV板 微量法】有关的信息/图片/价格等及提供 【乙醇酸氧化酶测定试剂盒 UV板 微量法】的商家公司简介、联系方式等信息。

在您的合法权益受到侵害时,请您致电,我们将竭诚为您服务,感谢您对【生物实验采购网】的关注与支持!

网站首页 | 关于我们 | 联系方式 | 使用协议 | 版权隐私 | 网站地图  |  排名推广  |  广告服务  |  积分换礼  |  网站留言  |  RSS订阅  |  违规举报
 
免责声明:本站有部分内容来自互联网,如无意中侵犯了某个媒体 、公司 、企业或个人等的知识产权,请来电或致函告之,本网站将在规定时间内给予删除等相关处理。