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2×HieffTM HotStart PCR Master Mix(No dye)

产品价格: ¥96.00

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发货时限:
暂无
所在地区:
中国上海
有效期至:
长期有效
最后更新:
2020-09-30 02:00:01
浏览次数:
369

产品详情

品牌名称:

UNICON® HotStart PCR Master Mix (No Dye)

产品信息

产品名称

产品编号

规格

储存

价格(元)

2×UNICON® HotStart PCR Master Mix (No Dye)

10112ES03

1 mL

-20

96.00

2×UNICON® HotStart PCR Master Mix (No Dye)

10112ES08

5×1 mL

-20

432.00

产品描述

2×UNICON® HotStart PCR Master Mix (No Dye)是即用型的PCR预混合溶液,含有UNICON® HotStart Taq DNA PolymerasedNTP以及优化的缓冲体系,只需加入引物和模板即可进行扩增,大大简化了实验的操作步骤,可以高通量操作并提高实验结果的重现性。UNICON® HotStart DNA Polymerase 的激活时间只需要 2-3 min,兼容现有的 PCR 程序。本产品防止了在样品准备阶段产生非特异扩增,可以有效地进行基因克隆和分型实验PCR产物具有3’-dA突出端,可轻松克隆至T载体。预混液中不含染料。 

产品应用

低拷贝基因扩增、基因型鉴定、菌落PCR

质量控制

核酸外切酶残留检测:20 μL本品和0.6 μg λDNA –Hind III37下孵育4 hDNA的电泳谱带无变化。

核酸内切酶残留检测:20 μL本品和1 μg λDNA37温育4 hDNA的电泳谱带无变化。

大肠杆菌残留DNA检测: 50 μL体系中,加入25 μL本品,以无菌ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA 基因。30个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。

运输与保存方法

冰袋运输。-20保存。

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

PCR反应体系(50 μL

组分

体积

终浓度

ddH2O

to 50 μL

-

模板DNA

适量

-

Primer正向 (10 μM)

2 μL

0.4 μM

Primer反向 (10 μM)

2 μL

0.4 μM

2×UNICON® HotStart PCR Master MixNo Dye

25 μL

1×

【注】:针对不同模板的最佳反应浓度有所不同,下表为50 μL反应体系推荐模板使用量,仅供参考。

模板种类

模板使用量

基因组DNA

50 ng-200 ng

质粒DNA

100 pg-20 ng

cDNA

1-5 μL (不超过反应体系的1/10)

PCR扩增程序

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

95

5 min

1

变性

95

30 sec

35

退火

50-60

30 sec

延伸

72

30 sec/kb

终延伸

72

10 min

1

【注】:1退火温度和时间:温度推荐使用50-60。退火温度过低会导致非特异性扩增。引物设计参考荧光定量引物标准。推荐退火时间设置为30 sec,可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。也可根据需要,设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度和时间。

2延伸温度和时间:温度推荐使用72。时间推荐使用30-60sec/kb

3扩增产物:请将PCR扩增产物放置于-20保存,防止DNA发生降解。

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货号

规格

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