CRISPR基因敲除小鼠/细胞服务

赛业生物历经12年发展，在大小鼠基因编辑领域已获得万千客户信任。基于12年专业基因敲除技术平台的成熟经验，赛业现同步提供基因敲除细胞株服务。欢迎咨询400-680-8038或发邮件至info@cyagen.com咨询订购。     超6800品系的CRISPR-AI敲除小鼠资源库与基因敲除细胞株特惠活动进行中，快快咨询我吧！   活动时间：2018年11月1日——12月31日活动对象：全国科研终端客户   

一、赛业生物CRISPR-Pro基因敲除常用大小鼠模型完全性基因敲除鼠CRISPR-Pro完全性基因敲除鼠是通过CRISPR /Cas9基因敲除技术，针对靶基因设计和构建gRNA与Cas9表达质粒，造成目的基因的功能区域被敲除，获得全身所有的组织和细胞中都不表达该基因的小鼠模型。CRISPR-Pro完全性基因敲除包括：移码突变、片段基因敲除、双/多基因敲除。条件性基因敲除鼠条件性基因敲除是通过把两个LoxP位点插入到目的基因的一个或几个重要外显子的两端以制备出有两个floxed小鼠。该floxed小鼠在与表达Cre重组酶小鼠杂交之前，该基因表达正常；当floxed小鼠与组织特异性表达Cre酶的小鼠进行杂交后，可实现在特定的组织或细胞中敲除该基因，而在其它组织或细胞中该基因表达正常。基因敲入鼠CRISPR-Pro基因敲入鼠是利用CRISPR/Cas9基因敲入技术，针对靶基因设计、构建相应的 gRNA质粒和donor vector，通过Cas9核酸酶的切割作用和同源臂的同源重组，引入特定的突变或外源基因。比如在目的基因上引入点突变(模拟人类遗传疾病模型)；或将报告基因(如EGFP，mRFP，mCherry，mYFP，或LacZ等)，从而可以通过报告基因来跟踪目标基因的表达；也可以用报告基因取代大小鼠本身的基因，使KO/KI同时发生。CRISPR-Pro基因敲入鼠包括：点突变、片段基因敲入。赛业生物模式动物平台服务能力强、设施先进。每年可构建基因敲除鼠、转基因鼠模型10000例以上，学术引用累计超过2000篇，是一家实力雄厚的基因工程模式动物商业服务平台。2016年，TurboKnockout将ES打靶金标准推向新高度，CRISPR-Pro使大片段敲入及条件性敲除变得更加高效；2017年，自主研发的AlphaKnockout基因打靶专家系统首次实现基于人工智能化的最优方案设计；同年7月推出万例CRISPR-AI敲除小鼠资源库，目前已建立超6800例全敲与条件性敲除冻存精子品系及超300例活体小鼠品系。赛业生物成立十二年来，一直致力于技术创新，十二年来的种种努力，让赛业生物稳步成为实力雄厚的转基因/基因敲除模式动物商业技术平台，成为国际上最主要、最被认可的基因工程模式动物商业服务平台之一。      二、赛业生物基因敲除细胞株服务赛业生物基因敲除细胞株采用电转方式进行转染，深度优化电转时间和电转剂量，大幅度提高了电转效率，缩短了构建周期；更有双gRNA同时打靶，实现大片段基因敲除，与移码突变相比，敲除更彻底。赛业基因敲除技术平台12年来已完成上万例基因敲除项目，平台成熟稳定，欢迎拨打400-680-8038咨询订购。基因敲除细胞株服务优势

     三、CRISPR-Pro技术介绍CRISPR/Cas9技术原理CRISPR/Cas9（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats）最新出现的一种由RNA指导Cas核酸酶对靶向基因进行特定DNA修饰的技术。CRISPR是细菌和古细菌为应对病毒和质粒不断攻击而演化来的获得性免疫防御机制。在这一系统中，crRNA（CRISPR-derived RNA）通过碱基配对与tracrRNA（trans-activating RNA）结合形成双链RNA，此tracrRNA/crRNA二元复合体指导Cas9蛋白在crRNA引导序列靶定位点剪切双链DNA达到对基因组DNA进行修饰的目的。CRISPR/Cas9系统能够对小鼠和大鼠基因组特定基因位点进行精确编辑， 目前已经成功应用于大、小鼠基因KO/KI的模型制备。CRISPR/Cas9技术特点1、可实现对靶基因多个位点或多个基因同时敲除；2、实验周期短，价格低；3、可应用于大、小鼠等，无物种限制。 赛业创新性CRISPR-Pro技术赛业生物创新性CRISPR-Pro技术，其独特的受精卵处理方式极大地提高了同源重组修复路径的效率，是常规CRISPR/Cas9敲除效率的3倍以上。 CRISPR-Pro技术原理Cas9/gRNA复合物在靶位点进行切割，产生双链断裂（DSB：Double-strand break），迫使细胞进行紧急修复。通常条件下，细胞偏向于使用非同源末端连接（NHEJ：nonhomologous DNA end joining）的方式对断裂的双链进行修复，进而造成靶位点基因的插入/缺失突变。CRISPR-Pro独特的受精卵处理方式，极大地提高了同源重组修复（HDR：Homology-directed recombination or repair）路径的效率，使得DNA大片段敲入（KI）及条件性敲除（cKO）得以实现。CRISPR-Pro技术优势1）周期短，效率高；2）高嵌合率，生殖遗传稳定；3）可实现DNA大片段敲入（长达10Kb）；4）可实现条件性敲除（长达4kb）；5）可实现大片段敲除（长达20kb）。