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通用基因组DNA提取试剂盒

产品价格: ¥400.00

最小起订量:暂无 可售数量:暂无

发货时限:
暂无
所在地区:
全国
有效期至:
长期有效
最后更新:
1970-01-01 08:00:00
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782

产品详情

品牌名称:

全血基因组DNA提取试剂盒

产品简介: 

本试剂盒为通用型,适合于从土壤,粪便,昆虫,以及其他样本中提取基因组 DNA。对细菌,真菌,昆虫等样本都具有很好的裂解效果,*大限度的保留了生物 DNA的多态性.使用本试剂盒提取的 DNA产量大、完整性好,可直接用于各种常规操作,包括酶切、PCR  、文库构建、Southern  杂交等实验。

操作步骤: 

使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。 

1、样品的处理: 

      1)土壤:称取 0.1-0.3g (根据干湿)土壤,放入研钵中,倒入适量的液氮,立即研磨,重复3  次,使土壤颗粒研成粉末,加 500ul溶液 A,振荡至彻底悬浮。 

      2)粪便:称取 0.1-0.3g (根据干湿)  粪便,加 500ul 溶液 A,振荡至彻底悬浮。 

      3)昆虫:称取 0.1-0.3g 昆虫,倒入适量的液氮,立即研磨,重复 3 次,使昆虫研成粉末,加 500ul 溶液

A,振荡至彻底悬浮。 

      4)未知样品,如为细未状,可直接称取 0.1-0.3g(根据干湿)加 500ul 溶液 A,如为块状,可 0.1-0.3g用液氮研磨成粉未,再加 500ul 溶液 A,振荡至彻底悬浮。 

2、向悬浮液中加入 20ul 10mg/ml 的 RNase A,55℃放置 10min。 

3、加入20ul 10mg/ml 的蛋白酶 K,充分混匀,55℃水浴消化,30min。消化期间可颠倒离心管混匀数次,12000转离心 10min。将上清转移到一个新的离心管中。如有沉淀,可再次离心。 

4、加入 500ul 溶液 B,充分混匀。如出现白色沉淀,于 55℃放置 5min,沉淀即会消失,不影响后续实验。如 溶液未变清亮,说明样品消化不彻底,可能导致提取的 DNA 量少及不纯,还有可能导致上柱后堵柱子,请增加消化时间。 

5、加入 500ul 无水乙醇,充分混匀,此时可能会出现絮状沉淀,不影响 DNA 的提取,可将溶液和絮状沉淀都加入吸附柱中,放置 2min (分两次加入,每次 700ul)。 

6、12000rpm离心 2min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。 

7、向吸附柱中加入 700ul 漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm 离心 1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。 

8、向吸附柱中加入 500ul漂洗液,12000rpm离心 1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。 

9、12000rpm离心 2min,将吸附柱置于室温或 50℃温箱放置数分钟,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,否则漂洗液中的乙醇会影响后续的实验如酶切、PCR 等。 

10、将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加 50-200ul 经 65℃水浴预热的洗脱液,室温放置5min,12000rpm离心 2min。 

11、离心所得洗脱液再加入吸附柱中,室温放置 2min,12000rpm离心 2min,即可得到高质量的基因组 DNA.

注意事项: 

1、由于样品不同,*终提取的 DNA 含量和纯度也有所不同,一般来说,如果所提取 DNA 用电泳的方法检测不到,PCR会有结果,样品尽可能的新鲜。否则会导致提取的 DN**段较小且提取量也下降。 

2、若试剂盒中的溶液出现沉淀,可在 65℃水浴中重新溶解后再使用,不影响提取效果。 

3、如果样品消化不彻底,后面的离心步骤中可能会出现堵柱子的情况,可适当延长离心时间。 

4、洗脱缓冲液的体积*好不少于 50ul,体积过小会影响回收效率;洗脱液的 pH值对洗脱效率也有影响,若需要用水做洗脱液应保证其 pH值在 8.0 左右(可用NaOH 将水的 pH值调至此范围),pH值低于 7.0 会降低洗脱效率;DNA产物应保存在-20℃,以防 DNA降解。 

5、DNA浓度及纯度检测(浓度较高时):得到的基因组DN**段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。回收得到的DN**段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。 DNA应在OD260有显著吸收峰,  OD260值为 1 相当于大约 50μg/ml双链DNA、 40μg/ml单链DNA。 OD260/OD280比值应为 1.7-1.9,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用去离子水,比值会偏低,因为pH值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低。 

本实验相关产品:

  E1020

EB染色液

  D1010

6×DNA Loading Buffer

  T1060

50×TAE缓冲液

  T1050

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  M1060

D2000DNALadder

  M1400

1kbDNALadder

  G8142

GoldViewII型核酸染色剂(5000×)

以下为索莱宝实验室自产相关试剂盒。

D1500 植物基因组DNA提取试剂盒 50T/100T 400/700
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D1700 动物组织/细胞基因组DNA提取试剂盒 50T/100T 400/700
D1800 全血基因组DNA提取试剂盒 50T/100T 400/700
D1850 全血基因组DNA提取试剂系统 50T/200T 360/960
D1900 酵母基因组DNA提取试剂盒 50T/100T 400/700
D2100 通用基因组DNA提取试剂盒 50T/100T 400/700
D2300 真菌基因组DNA提取试剂盒 50T/100T 500/850
D2400 DNA病毒基因组提取试剂盒 50T/100T 400/700
D2600 土壤基因组DNA提取试剂盒 50T/100T 680/1200
D2700 粪便基因组DNA提取试剂盒 50T/100T 400/700
R2000 RNA病毒基因组提取试剂盒 50T/100T 700/1180
北京索莱宝科技有限公司目前备有现货1500种,当天即可发货,可以满足大部分高等院校以及高级研究所的实验要求,同时省去您焦急等待的时间。欢迎前来咨询。

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