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RNA病毒基因组提取试剂盒

产品价格: ¥700.00

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全国
有效期至:
长期有效
最后更新:
1970-01-01 08:00:00
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1031

产品详情

品牌名称:

RNA病毒基因组提取试剂盒  

 

产品简介: 

本试剂盒适合于从血清、细胞上清、淋巴液中提取 RNA病毒基因组,不适合于细胞等组织内 RNA病毒基因组的提取。使用本试剂盒提取的基因组 RNA可用于 RT-PCR 实验。 

 

操作步骤:

使用前请先在漂洗液中加入一瓶新开启的无水乙醇,加入到离瓶口约 0.5-1cm 距离,盖好摇匀。所有离心步骤均在 2-8℃条件下进行。 

1、 取病毒上清液 0.5ml,12000rpm离心 5min,尽量吸尽上清使用,弃去沉淀(如无沉淀可省去此步)。 

2、 向病毒上清中加入 20ul 10mg/ml 的蛋白酶 K,充分混匀,65℃消化 10min,期间可颠倒离心管混匀数次。 

3、 吸附柱前处理:从包装中取出吸附柱,放入收集管中,加入 700ul  洗柱液,室温放置 2分钟, 2-8℃ 12000rpm离心 2min,弃废液,将吸附柱放入收集管中待用。 

4、 向病毒上清中加入 500ul结合液,充分混匀。再向管中加入 400ul 无水乙醇,充分混匀,此时可能会出现絮状沉淀,不影响 RNA 的提取,可将溶液和絮状沉淀都加入吸附柱中,静置 2min。(吸附柱的*大容积为 750ul,可分两次加入。一次吸附完离心后再将余下的混合液体加入柱中静置离心。) 

5、12000rpm离心 2min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。 

6、 向吸附柱中加入 700ul 漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心 1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。 

7、 向吸附柱中加入 500ul 漂洗液,12000rpm离心 1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。 

8、 12000rpm 离心 2min,将吸附柱置于室温或 50℃温箱放置数分钟,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,否则漂洗液中的乙醇会影响后续的实验如酶切、PCR等。 

10、将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加 50ul-100ul 经 65℃水浴预热的 RNase free 

ddH2O,室温放置 5min,12000rpm离心 2min。即可得到高质量的病毒基因组 RNA。 

 

注意事项: 

1、经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致 RNase 污染。使用无 RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。 

2、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的 RNA提取量也下降。 

3、若结合液中有沉淀,可在 37℃水浴中重新溶解。 

4、如果样品消化不彻底,后面的离心步骤中可能会出现堵柱子的情况,可适当延长离心时间。 

5、洗脱缓冲液的体积*好不少于 50ul,体积过小会影响回收效率。 

6、RNA产物应保存在-70℃,以防 RNA降解。 

7、RNA 检测:得到的基因组 RNA 片段的大小与病毒的保存条件和种类等因素有关。由于病毒不含有核糖体RNA,所以常规电泳无法检测,只有后期实验才可检测到。 D260值为1相当于大约40 μg/ml单链RNA。

 

 

 

本实验相关试剂:

R1600

DEPC处理水

SR0060

液相RNase清除剂

SR0040

固相RNase清除剂

P1011

酚:氯仿:异戊醇=25241PH<5.0

P1023

酚:氯仿=2524PH<5.0

R1050

5×RNALoadingBuffer

SR0080

RNAsaverRNA长效保存液

SR0020

RNAwait(非冻型组织RNA保存液)

M1010

10×MOPS缓冲液

SY1040

SYBRGreen(10000×)

R1100

TriQuickRNA提取试剂

R1200

RNA提取试剂盒

以下为索莱宝实验室自产相关试剂盒。

D1500 植物基因组DNA提取试剂盒 50T/100T 400/700
D1600 细菌基因组DNA提取试剂盒 50T/100T 400/700
D1700 动物组织/细胞基因组DNA提取试剂盒 50T/100T 400/700
D1800 全血基因组DNA提取试剂盒 50T/100T 400/700
D1850 全血基因组DNA提取试剂系统 50T/200T 360/960
D1900 酵母基因组DNA提取试剂盒 50T/100T 400/700
D2100 通用基因组DNA提取试剂盒 50T/100T 400/700
D2300 真菌基因组DNA提取试剂盒 50T/100T 500/850
D2400 DNA病毒基因组提取试剂盒 50T/100T 400/700
D2600 土壤基因组DNA提取试剂盒 50T/100T 680/1200
D2700 粪便基因组DNA提取试剂盒 50T/100T 400/700
R2000 RNA病毒基因组提取试剂盒 50T/100T 700/1180
北京索莱宝科技有限公司目前备有现货1500种,当天即可发货,可以满足大部分高等院校以及高级研究所的实验要求,同时省去您焦急等待的时间。欢迎前来咨询。

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