产品信息
产品描述
传统方法常使用单价盐,乙醇/异丙醇沉淀DNA/RNA,但该方法受其浓度的影响,当核酸浓度低于50ng/ml时,则较难定量,且沉淀后形成的核酸沉淀肉眼难以辨别,影响回收率。而加入线性丙烯酰胺则会改善这些情况,并提高核酸得率。
线性丙烯酰胺 ,英文名称Linear Acrylamide(Linear Polyacrylamide,简称LPA),是一种共沉淀剂,有助于核酸纯化过程中核酸的沉淀。本质上讲,该丙烯酰胺是一种中性载体,且非生物性来源,因此,不含潜在的核酸或核酸酶污染。此外,本品不会干扰A260/A280读数、且不会抑制聚合酶以及限制性内切酶活性,因此兼容于其他后续分子生物学应用,如PCR,酶切消化等。
本品为线性丙烯酰胺溶液,浓度为5mg/ml,无DNase、RNase酶以及核酸污染。使用时2-4μl(即10-20μg)溶液即可用于1ml DNA或RNA溶液的沉淀。
运输和保存方法
冰袋运输。4℃保存,至少一年有效。
操作步骤
1)添加线性化丙烯酰胺到样本内使其终浓度为10-20μg/ml,完全混匀;
2)添加一倍体积的异丙醇或者两倍体积的乙醇至样本内(乙醇推荐用于沉淀寡核苷酸);
3)将样本至于-20℃ 冰浴10min,然后于10,000g以上的转速至少离心10min;
4)小心去除上清【注意:线性化丙烯酰胺沉淀不能紧紧粘附在离心管底,去除上清液的过程中小心操作防止去除沉淀】,然后重悬沉淀于水,TE缓冲液或其他合适的缓冲液内。
注意事项
1)使用前请回温至室温。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。