点击图片查看原图

FITC Phalloidin FITC标记鬼笔环肽

产品价格: ¥766.00

最小起订量:暂无 可售数量:暂无

发货时限:
暂无
所在地区:
中国上海
有效期至:
长期有效
最后更新:
2020-07-08 02:00:03
浏览次数:
227

产品详情

品牌名称:

产品信息

产品名称

产品编号

规格

外观

储存             

价格(元)

FITC Phalloidin FITC标记鬼笔环肽

40735ES75

300T

液体

-20℃避光保存

766.00

FITC Phalloidin FITC标记鬼笔环肽

40735ES80

1mg

冻干粉

-20℃避光保存

6456.00

背景描述

鬼笔环肽(Phalloidin)是一种来源于毒蕈类鬼笔鹅膏(Amanita phalloides)的环状七肽毒素,以高亲和力(Kd= 20 nM)选择性结合于丝状肌动蛋白F-actin,而不会与单体肌动蛋白G-actin结合,通常用来标记组织切片,细胞培养物或无细胞体系中的F-actin,从而对F-actin进行定性和定量分析。另外,鬼笔环肽衍生物也以相近的亲和力结合于大小纤维,无论是动植物来源的肌肉细胞或非肌肉细胞,按照每一个肌动蛋白亚基约与一个鬼笔环肽分子的计量比结合。且非特异性结合几乎可忽略,染色区域和非染色区域辨识度非常明显。因此,鬼笔环肽衍生物特别适合替代肌动蛋白(Actin)抗体进行相关研究。另外鬼笔环肽衍生物很小,直径约12-15Å,分子量<2000 Daltons,未标记肌动蛋白(Actin)的许多生理特性都得以维持,比如,同肌动蛋白结合蛋白如肌球蛋白,原肌球蛋白,DNase I等仍能发生反应;鬼笔环肽标记的纤维丝仍可穿透固相肌球蛋白基质;以及甘油抽提的肌纤维标记后仍可收缩等。

鬼笔环肽(Phalloidin)的结合阻止丝状肌动蛋白(微丝)的解离,稳定微丝结构,从而破坏微丝的聚合-去聚合的动态平衡。此特性使得肌动蛋白聚合发生的临界浓度(CC)降至<1μg/mL,因此,可用作一种聚合促进剂。此外,鬼笔环肽还可抑制F-actinATP水解活性。

本品为FITC标记的鬼笔环肽,染色反应特异性强,对比性高,具有比Actin抗体更好的染色效果,适合用作F-actin的定性和定量检测。另外,经本品结合后的F-actin仍能维持actin自身具有的许多生物学特性。且本品的结合没有物种差异性,适用性广泛。

我司分别提供冻干粉形式(货号:40735ES80)和储存液形式(货号:40735ES75,浓度为20μM)的FITC标记鬼笔环肽,用户根据自身需求选择。建议使用浓度为80~200nM

产品性质

分子式(Molecular Formula

C56H60N10O15S2

分子量(Molecular Weight

1177.3

最大激发/发射波长(Ex/Em

495~496/513~516nm

多肽序列(Sequence

FITC-bicyclic(Ala-DThr-Cys-cis-4-hydroxy-Pro-Ala-2-mercapto-Trp-4-hydroxy-5-amino-Leu)(S-3 to 6)

外观(Appearance

黄色粉末(冻干粉)

溶解性(Solubility

溶于DMSODMF、甲醇或者乙*水溶液(20%

运输与保存方法

冰袋运输。-20℃避光干燥保存, 1年有效。

注意事项

1. 鬼笔环肽具有毒性,需小心操作(对人的半数致死剂量LD502mg/kg)。

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

需要自备材料

1. (可选)甲醇

2. 1×PBS缓冲液, pH 7.4, 细胞培养级别(货号:60145ES76

3. 固定液4%多聚甲醛(溶于PBS缓冲液)(货号:36314ES60

4. 丙***或透化液0.5% Triton X-100(溶于PBS缓冲液)

5. Fluoromount-GTM 水溶性封片剂(不含DAPI)(货号:36307ES08),DAPI(货号:40727ES10

6. (可选)DAPI Fluoromount-GTM 水溶性封片剂(含DAPI)(货号:36307ES08

7. (可选)BSA,标准级别(货号:36101ES25

8. 载玻片和盖玻片

9. 盖玻片周围密封液(如透明指甲油)

10. 组装有FITC激发/发射滤片,以及DAPI激发/发射滤片的荧光显微镜或共聚焦显微镜。

操作步骤

1.       工作液准备

1)   对于FITC标记鬼笔环肽(货号:40735ES75300T

本品以溶于甲醇的20μM储存液形式提供,总量为300μL。按照100nM的工作液浓度来换算,可制备总量为60mL的工作液。建议收到产品后,根据单次使用量,对母液进行小量分装,-20℃避光冻存,一年稳定。

开始实验前,使用1×PBS缓冲液稀释储存液到需要的工作浓度。推荐工作浓度为:80~200nM。工作液现配现用。

2)   对于FITC标记鬼笔环肽(货号:40735ES801mg

本品以冻干粉形式提供,分子量为1177.3,总量为1mg。可先用甲醇或者DMSO充分溶解配制成20~100μM的储存液。如,加入8.494mL甲醇到1mg鬼笔环肽即得到100μM等量的储存液,根据单次使用量,进行小量分装,-20℃避光冻存,一年稳定。

开始实验前,使用1×PBS缓冲液稀释储存液到需要的工作浓度。推荐工作浓度为:80~200nM。工作液现配现用。

2.      染色步骤

1 细胞爬片生长24h,使其密度达到50%汇合度。

2 吸掉培养液,37℃预热的1×PBSpH 7.4清洗细胞2次。

3 使用溶于PBS4%甲醛溶液进行细胞固定,室温固定10min

注意:避免固定剂中含有甲醇成分,因为甲醇在固定过程中可能破坏肌动蛋白。

4 室温条件下,用PBS清洗细胞2~3次,每次10min

5 室温条件下,用丙***(≤-20℃)脱水或者用0.5% Triton X-100溶液透化处理5min

6 室温条件下,用PBS清洗细胞2~3次,每次10min

7 200μl配制好的 FITC标记鬼笔环肽工作液,覆盖住盖玻片上的细胞,室温避光孵育30min(通常情况下,4~37℃孵育皆可)。

注意:为了降低背景,可于FITC标记的鬼笔环肽工作液内加入1% BSA;另外,孵育过程中为了避免溶液挥发,可将盖玻片转移到一个密封的容器内。

8 PBS清洗盖玻片3次,每次5min

9 使用200μl DAPI溶液(浓度:100 nM)对细胞核进行复染,约30s

10 PBS清洗盖玻片,然后倒置在已经滴有一滴Fluoromount-GTM 水溶性封片剂的载玻片上。使用纸巾轻轻檫掉多余封片剂,然后用指甲油永久封片。此法制备的标本玻片可置于4℃避光保存,通常6个月内可继续做F-actin染色分析。

注意:也可以直接使用含有DAPI的抗荧光淬灭封片剂(货号:36308ES11)合并步骤910),简化步骤。

11 荧光显微镜或者共聚焦显微镜下进行荧光观察,选择FITC激发/发射滤片(Ex/Em=496/516nm)和DAPI激发/发射滤片(Ex/Em=364/454nm)。

相关产品

产品编号

产品名称

规格

价格(元)

40733ES03

Amino-Phalloidin 氨基鬼笔环肽

1mg

6399.00

40734ES75

TRITC Phalloidin 罗丹明标记鬼笔环肽

300T

766.00

40734ES80

TRITC Phalloidin 罗丹明标记鬼笔环肽

1mg

6456.00

40735ES75

FITC Phalloidin FITC标记鬼笔环肽

300T

766.00

40735ES80

FITC Phalloidin FITC标记鬼笔环肽

1mg

6456.00

40736ES75

iFluor™ 488 phalloidin iFluor™ 488标记鬼笔环肽(绿色)

300T

1689.00

40737ES75

iFluor™ 555 phalloidin iFluor™ 555标记鬼笔环肽(橘色)

300T

1689.00

40762ES75

iFluor™ 647 phalloidin iFluor™ 647标记鬼笔环肽(远红)

300T

1689.00

 

免责声明

本网页所展示的有关【FITC Phalloidin FITC标记鬼笔环肽】的信息/图片/参数等由的会员【上海前尘生物科技有限公司 】提供,由【生物实验采购网】会员【上海前尘生物科技有限公司 】自行对信息/图片/参数等的真实性、准确性和合法性负责,本平台(本网站)仅提供展示服务,请谨慎交易,因交易而产生的法 律关系及法律纠纷由您自行协商解决,本平台(本网站)对此不承担任何责任。您在本网页可以浏览【FITC Phalloidin FITC标记鬼笔环肽】有关的信息/图片/价格等及提供 【FITC Phalloidin FITC标记鬼笔环肽】的商家公司简介、联系方式等信息。

在您的合法权益受到侵害时,请您致电,我们将竭诚为您服务,感谢您对【生物实验采购网】的关注与支持!

网站首页 | 关于我们 | 联系方式 | 使用协议 | 版权隐私 | 网站地图  |  排名推广  |  广告服务  |  积分换礼  |  网站留言  |  RSS订阅  |  违规举报
 
免责声明:本站有部分内容来自互联网,如无意中侵犯了某个媒体 、公司 、企业或个人等的知识产权,请来电或致函告之,本网站将在规定时间内给予删除等相关处理。