Calcium Phosphate Cell Transfection Kit
***酸钙法细胞转染试剂
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 储存 | 价格(元) |
Calcium Phosphate Cell Transfection Kit ***酸钙法细胞转染试剂 | 40803ES70 | 200T | -20℃ | 625.00 |
产品描述
***酸钙法转染DNA是基于形成***酸钙-DNA沉淀的原理:***酸钙可促使细胞膜和DNA的结合,之后通过细胞内吞的作用将外源DNA转入目的细胞。该方法曾被用于多种细胞系的转染。翊圣生物的***酸钙法细胞转染试剂是在传统***酸钙法的基础上经过特别优化,不仅在转染效率有了较大提高,且降低了细胞毒性,特别适合于293或293T细胞的转染,对其他大多数常见细胞如Hela、CHO也具有较好的转染效果,不仅适用于细胞的瞬时转染,且适用于稳转株的筛选。
本品为无菌包装,可直接使用。
产品组分
组分编号 | 组分名称 | 40803ES70/规格 |
40803-A | CaCl2溶液 | 20ml |
40803-B | BBS溶液 | 20ml |
运输和保存方法
冰袋运输。-20℃保存,有效期1年。
注意事项
1)为了您的安全和健康,请?实验服并戴一次性手套操作。
2)高纯度的质粒是获得高转染效率的必要条件,确保A260/A280>1.8,且电泳检测抽提到的质粒90%以上都是超螺旋。
3)在用***酸钙法转染细胞时应使用浓度不高于5%的CO2,CO2的最佳浓度为3%左右。
4)BBS溶液的pH值直接关系到转染效率,尽量避免把BBS溶液长时间暴露在空气中,以免被空气中的CO2酸化。
5)转染时由于质粒、细胞不同,最佳的质粒用量需自行摸索。
使用说明
1. 对于贴壁细胞(以6孔板为例)
①转染前一天(20-24h),胰酶消化细胞并计数,细胞铺板,使其在转染时密度为70-90%。
②在转染前30-60min,吸去细胞培养液,加入新鲜的完全培养液(不含抗生素)2ml。
【注】:转染时最好使用新鲜配制的培养液;转染用的培养液可以在配制后分装冻存,使用时再解冻。
③取2-6µg待转染的质粒DNA(质粒总体积不宜超过20µl),加入到100µl CaCl2溶液中,充分混匀。
④把DNA- CaCl2溶液加入到100µl BBS溶液中,混匀,室温孵育10-20min。此时不会产生可见的沉淀。
【注】:该步骤顺序不能反,需把DNA- CaCl2溶液加入到BBS溶液中,不要把BBS溶液加入到DNA- CaCl2溶液中。
⑤把DNA- CaCl2-BBS混合物均匀滴加到整个6孔板内。5%CO2,37℃培养细胞。
⑥根据实验要求和***酸钙对于不同细胞的毒性不同,在4-16h后轻轻晃动培养板数次以充分悬浮一些***酸钙沉淀,吸去含***酸钙沉淀的培养液,加入2ml新鲜的完全培养液,继续培养。
⑦通常在转染约24h后就可以检测到转染基因的表达。
2. 对于悬浮细胞(以6孔板为例)
①离心收集悬浮细胞,用PBS洗涤一次。
②按照上面的步骤③和④制备DNA- CaCl2-BBS混合物。
③每106个细胞的沉淀,用100µl DNA- CaCl2-BBS混合物重新悬浮,室温放置20min。
⑤ 5% CO2,37℃培养细胞。
⑥ 根据实验要求和***酸钙对于不同细胞的毒性不同,在4-16 h后离心收集细胞,用PBS洗一次,然后用2 ml完全培养液重新悬浮细胞,继续培养。
⑦ 通常在转染约24 h后就可以检测到转染基因的表达。
相关产品
产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格(元) | 促销价(元) |
40801ES04 | HG_TransGeneTM tranfection reagent | 1.5 ml | 3000.00 |
|
40802ES01 | Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂质体核酸转染试剂 | 100 μl | 168.00 | 118.00 |
40802ES02 | Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂质体核酸转染试剂 | 0.5 ml | 738.00 | 488.00 |
40802ES03 | Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂质体核酸转染试剂 | 1.0 ml | 1308.00 | 868.00 |
40802ES08 | Hieff TransTM Liposomal Transfection Reagent 脂质体核酸转染试剂 | 5×1 ml | 4878.00 | 3248.00 |
40803ES70 | Calcium Phosphate Cell Transfection Kit ***酸钙法细胞转染试剂 | 200 T | 298.00 |
|
40804ES76 | Polybrene (hexadimethrine bromide) 聚凝胺(10 mg/ml) | 500 μl | 180.00 |
|
40804ES86 | Polybrene (hexadimethrine bromide) 聚凝胺(10 mg/ml) | 5×500 μl | 500.00 |
|
40805ES01 | Hieff TransTM Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent 悬浮细胞专用脂质体核酸转染试剂 | 100 μl | 228.00 | 178.00 |
40805ES02 | Hieff TransTM Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent 悬浮细胞专用脂质体核酸转染试剂 | 0.5 ml | 948.00 | 598.00 |
40805ES03 | Hieff TransTM Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent 悬浮细胞专用脂质体核酸转染试剂 | 1.0 ml | 1678.00 | 998.00 |
40805ES08 | Hieff TransTM Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent 悬浮细胞专用脂质体核酸转染试剂 | 5×1 ml | 5268.00 | 3698.00 |
HB170520