本试剂盒采用竞争CLIA法。用ET抗原包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的ET与包被的ET竞争生物素标记的抗ET单抗上的结合位点,游离的成分被洗去。加入辣根过氧化物酶标记的亲和素,生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入发光底物混合液,发光底物在辣根过氧化物酶的催化下发出荧光,用化学发光免疫分析仪测定化学发光值(RLU),ET浓度与化学发光值之间呈负相关,通过绘制标准曲线计算出样品中ET的浓度。
英文名称 Human ET (Epi***) CLIA Kit 中文名称 人表**(ET)化学发光免疫分析试剂盒 货号 E-CL-H0729c 种属 Human/人 规格 96T/Kit (8*12 wells) 检测方法 竞争法 检测范围 31.25~2000pg/mL 灵敏度 18.75pg/mL
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1.在各孔中加入标准品或样品各50μL
2. 立即加入50μL 生物素化抗体工作液,37℃孵育45分钟
3. 洗涤 3 次
4. 加入 100μL 酶结合物工作液, 37℃孵育 30 分钟
5. 洗涤 5 次
6. 加入 100μL 发光底物混合液, 37℃孵育 5 分钟左右
7. 立即测定各孔的化学发光值
8. 结果计算