2×UNICONTM HotStart PCR Master Mix (With Dye)
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 储存 | 价格(元) |
2×UNICONTM HotStart PCR Master Mix (With Dye) | 10111ES03 | 1 mL | -20℃ | 96.00 |
2×UNICONTM HotStart PCR Master Mix (With Dye) | 10111ES08 | 5×1 mL | -20℃ | 432.00 |
产品描述
2×UNICONTMHotStart PCR Master Mix (With Dye)是即用型的PCR预混合溶液,含有UNICONTM HotStart Taq DNA Polymerase,dNTP以及优化的缓冲体系,只需加入引物和模板即可进行扩增,大大简化了实验的操作步骤,提高了高通量操作和实验结果的重现性。UNICONTM HotStartTaq DNA Polymerase是UNICONTM Taq抗体和HieffTM TaqDNA Polymerase的混合产品。UNICONTM Taq抗体与HieffTM Taq DNA Polymerase具有很高的亲和力,高温50℃处理30min,依旧可以封闭HieffTM Taq DNA Polymerase的活性。UNICONTM HotStart Taq DNA Polymerase在预变性温度下加热30 sec完全失活,释放出DNA聚合酶活性。使用该热启动taq酶可以有效抑制引物非特异性退火导致的扩增。
预混液中已加入电泳缓冲液和染料,使得PCR产物可以直接进行电泳,染料的存在不会干扰扩增效率。PCR产物具有
产品应用
低拷贝基因扩增、基因型鉴定、菌落PCR
质量控制
核酸外切酶残留检测:20 μL本品和0.6 μg λDNA -HindIII,37℃下孵育4h,DNA的电泳谱带无变化。
核酸内切酶残留检测:20 μL本品和1μg λDNA,37℃温育4 h,DNA的电泳谱带无变化。
大肠杆菌残留DNA检测:50 μL体系中,加入25 μL本品,以无菌ddH2O为模板,扩增E.coil16s rDNA 基因。30个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。
运输与保存方法
冰袋运输。-20 ºC保存。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
PCR反应体系(50 μL)
组分 | 体积 | 终浓度 |
ddH2O | to 50 μL | - |
模板DNA | 适量 | - |
引物正向(10 μM) | 2 μL | 0.4 μM |
引物反向(10 μM) | 2 μL | 0.4 μM |
2×UNICONTM HotStart PCR Master Mix(With Dye) | 25 μL | 1× |
【注】:针对不同模板的最佳反应浓度有所不同,下表为50 μL反应体系推荐模板使用量,仅供参考。
模板种类 | 模板使用量 |
基因组DNA | 50 ng-200 ng |
质粒DNA | 100 pg-20 ng |
cDNA | 1-5 μL (不超过反应体系的1/10) |
PCR扩增程序
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 95℃ | 5 min | 1 |
变性 | 95℃ | 30 sec | 35 |
退火 | 50-60℃ | 30 sec | |
延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | |
终延伸 | 72℃ | 10 min | 1 |
【注】:1) 退火温度和时间:温度推荐使用50-60℃。退火温度过低会导致非特异性扩增。引物设计参考荧光定量引物标准。推荐退火时间设置为30 sec,可以在10-30sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。也可根据需要,设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度和时间。
2)延伸温度和时间:温度推荐使用72℃。时间推荐使用30sec/kb。
3) 扩增产物:请将PCR扩增产物放置于-20℃保存,防止DNA发生降解。
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产品名称 | 产品货号 | 规格 | 价格(元) |
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10135ES80 | 1000 U | 4256.00 | |
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10208ES80 | 10×100 g | 1869.00 | |
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HB170522