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干细胞温和消化酶

产品价格: ¥230.00

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全国
有效期至:
长期有效
最后更新:
2021-05-31 01:30:04
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97

产品详情

品牌名称:

干细胞温和消化酶

  

【干细胞温和消化酶   用途与描述】

专门用于干细胞的消化,包括脐带间充质干细胞,脂肪间充质干细胞,胚胎干细胞(ES)等。消化作用极其温和,对细胞的损害小。为目前干细胞临床研究与临床应用领域的最新产品。

本产品特别适用于大规模生产干细胞的企业。消除了导致干细胞培养失败的最大隐患——消化过度问题。本产品也特别适用于干细胞药物的研究与开发企业。无任何动物来源组分,成分明确,极大降低了干细胞药物申报的验证工作量与申报难度。

【干细胞温和消化酶   规格与保存】

产品名称

产品货号

规格与保存

干细胞温和消化酶 NC1004

100mL/瓶,2-8℃保存,效期12个月

【干细胞温和消化酶   产品特点】

1. 产品容错性极好。即便消化时间长达15分钟,对干细胞的后续传代也几乎没有影响。减少了对操作人员技能的要求。

2. 即取即用,不需等待。4℃可稳定保存一年,不再需要-20℃保存。

3. 纯人工合成,无任何动物来源组分。无感染疯牛病毒(天然牛胰酶)或口蹄疫病毒(天然猪胰酶)的可能性。成分明确,无任何未知的后果。

【干细胞温和消化酶   产品性能】

 新一代消化产品(温和消化酶)与传统消化产品(猪牛天然胰酶)全面对比表

项目类型

细分类别

传统产品

 新一代产品

消化性能

正常消化 (未消化过度)

细胞活率

85% 95%以上
消化后继续培养得到的细胞数 1.06x106 1.14x106

超时消化 (消化过度)

细胞活率 60% 95%以上
消化后继续培养得到的细胞数 0.64x106 1.08x106

极端消化 (15分钟消化)

细胞活率 0-10% 90%以上
消化后继续培养得到的细胞数 无法收货细胞 1.04x106
使用便利程度

消化后是否需要终止?

需要 不需要

是否需要-20℃保存?

需要 不需要

是否可以即取即用?

不可以 可以
使用综合成本 终止消化的成本

高。 需要使用血清、完全培养基或胰酶抑制剂。

极低。 不需终止消化。 加PSB稀释即可。

细胞应用前病毒检测的成本

高。 需检测猪口蹄疫、牛 疯牛病等动物病毒。

0成本。 无动物源,所以无需检测

产品安全性

是否无动物来源组分?

不是

是否可以确知无动物病毒?

不可以 可以
细胞药物申报难度

产品的残留影响的证明难度

极大。 各种杂质组分不明, 难以证明。

小。 成分明确,均为人工 合成的组分。

 上述数据为接种脐带来源的MSC的P2代种子细胞,T25培养瓶,接种密度8000 cells/cm2,72小时后消化所得P3代细胞的对应数据。

正常消化(未消化过度)时,温和酶 确定好于 传统胰酶。

P2代MSC种子细胞,传代培养72小时后,分别用温和酶和传统胰酶消化,得到P3代MSC细胞,检测消化后的细胞活率。P3代MSC细胞继续培养72小时,分别用温和酶和传统胰酶消化,收获P4代MSC细胞,细胞计数。

细胞数量方面相差不大:温和酶比传统胰酶多出 7%。细胞活率方面相差较大:温和酶比传统胰酶高出10%。

对比类别 传统胰酶 温和消化酶
P3代MSC细胞活率 85% 95%
收到的P4代MSC细胞数量 1.06x106cells 1.14x106cells

复苏P2代MSC种子细胞,连续传代3次,分别用温和酶和传统胰酶消化。细胞数量方面:每一代温和酶均比传统胰酶多出 5%-10%。

4℃可稳定保存一年,不再需要-20℃保存。

干细胞温和消化酶在4℃环境下保存14个月,在超过有效期两个月后,酶活性仍保持在96%。

 

操作更便利,消化后不需终止消化,PBS稀释即可。

传统胰酶消化细胞后,需要额外添加血清,或完全培养基,或胰酶抑制剂,结合胰酶的消化位点,以达到终止消化的目的。温和消化酶由于其设计原理,在消化细胞后,不需要终止消化,只需要添加PBS,稀释消化酶,离心去除即可。极大便利了操作。

成分明确,无任何动物来源组分,更安全。更适合临床研究、临床应用或药物申报用途。

传统胰酶,取自牛或猪羊的胰脏,经后期纯化结晶而得。动物来源与提取工艺决定了传统胰酶难以避免感染动物病毒,如疯牛病毒,猪口蹄疫病毒等。因此难以应用于生物制药与细胞治疗等临床相关领域。温和消化酶,为全人工合成酶,消化位点清晰,经原核或真核系统表达,生产过程无任何动物来源组分的引入,所以安全性极高,尤其适用于生物制药与细胞治疗等临床相关领域。

超时消化(消化过度)时,温和酶可多收细胞 68%。

分别超时2min消化MSC细胞,后传代培养72小时,收获细胞进行计数:温和酶收到的细胞数量超出传统胰酶 68%。且细胞镜下形态良好。而经传统胰酶消化的细胞,培养后镜下细胞形态杂乱。

传统胰酶延长消化2分钟,MSC的细胞照片 传统胰酶消化后,传代72h 后的细胞照片
温和酶延长消化2分钟,MSC的细胞照片 温和酶消化后,传代72h 后的细胞照片

 极端消化(消化15分钟)时,温和酶基本不受影响。传统胰酶完全失败。

分别 15min消化MSC细胞,后传代培养72小时,收获细胞进行计数:温和酶收到的细胞数量超出传统胰酶 11倍。且细胞镜下形态良好。而经传统胰酶消化的细胞,培养后镜下细胞形态杂乱。

传统胰酶延长消化15分钟,MSC的细胞照片 传统胰酶消化后,传代72h 后的细胞照片
温和酶延长消化15分钟,MSC的细胞照片 温和酶消化后,传代72h 后的细胞照片

【干细胞温和消化酶   使用方法】

一、细胞消化前准备(以T25瓶为例)

1、观察贴壁细胞长满整个培养瓶视野80%以上,弃去细胞培养液。2、用5mL无钙镁的HBSS溶液或PBS清洗贴壁细胞,弃去清洗液。

二、细胞消化过程(以T25瓶为例)1、向T25瓶中加入1mL干细胞温和消化酶,置于室温环境中消化细胞。2、约2min后,细胞变圆,立即加入5mL PBS溶液进行稀释。3、将上述6mL含细胞液体转移至离心管中,置于离心机中离心,1000rpm,5min。4、去除离心管中的上清液。5、根据接下来的应用目的在离心管中加入干细胞培养基(细胞传代用途)或细胞冻存液(细胞冻存 用途)。

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