货号: | A3320201 |
供应商: | 恒斐生物 |
数量: | 现货 |
英文名: | CultureOne™ Supplement (100X) |
规格: | 5ml |
神经元培养可维持5+周
CultureOne添加剂用于确保从人多能干细胞(hPSC)源神经干细胞(NSCs)分化的神经细胞在下游应用之中具有最高的利用率。
实验数据
- 改善下游检测
- 加速神经元成熟
- 出色的富集方法
CultureOne添加剂可以改善成像、RNA表达及电生理检测结果。相对于传统的分化方法,采用CultureOne添加剂分化2周后,成像结果显示神经细胞分布均匀(MAP2+),NSCs (SOX1+)和细胞结块减少75%以上(A)。这些细胞具有更高的神经元mRNA表达,更低的神经干细胞 mRNA表达(B),多电极阵列(MEA)测定时具有更高的发放频率。
A. 分化2周后呈像
传统分化
CultureOne添加剂
B. 2周后 qPCR测定mRNA表达
CultureOne添加剂的作用机制
简单、易于扩展规模的神经元细胞培养实验方案
神经元分化培养基的经典配方(基于100 mL的终体积)
试剂 | 货号 | 体积 | |
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Gibco™ Neurobasal™ Medium | 21103049 | 96 mL | |
Gibco™ B-27™ Supplement (50x) | 17504044 | 2 mL | |
Gibco™ GlutaMAX™ Supplement (100x) | 35050061 | 1 mL | |
Gibco™ CultureOne™ Supplement (100x) | A3320201 | 1 mL | |
Ascorbic acid (200 mM, e.g., Sigma-Aldrich™ Cat. No. A8960) | NA | 100 µL | |
可将10-20 ng/mL的胶质细胞源神经营养因子(GDNF)和10-20 ng/mL脑源神经营养因子(BDNF)加入到神经元分化培养基(NDMC)之中,以提升由不同神经干细胞细胞系得到的神经元的存活率。 |
常规的两周神经干细胞分化方案所需的NDMC体积(采用CultureOne添加剂的神经元分化培养基)
多聚赖氨酸和层粘连蛋白包被的培养平板(孔数#) | 孔表面积(cm2) | 每孔建议的NSCs(5 x 104 细胞/cm2) | NDMC之中的NSCs浓度(细胞/mL) | 每孔铺盘的NSC/NDMC悬液体积(mL) | 每孔的NDMC营养物体积(mL) | 每孔总的NDMC营养物补充次数(每周饲养2-3次) | 每板的总NDMC体积(mL) | 每500 mL NDMC(对应1单位的CultureOne添加剂)对应的板数 |
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96 | 0.32 | 16,000 | 160 | 0.1 | 0.1 | 5 | 57.6 | 8 |
48 | 0.95 | 47,500 | 238 | 0.2 | 0.2 | 5 | 57.6 | 8 |
24 | 1.90 | 95,000 | 190 | 0.5 | 0.5 | 5 | 72.0 | 6 |
12 | 3.80 | 190,000 | 190 | 1.0 | 1.0 | 5 | 72.0 | 6 |
6 | 9.60 | 480,000 | 240 | 2.0 | 2.0 | 5 | 72.0 | 6 |
采用CultureOne添加剂获得的细胞产量
在我们的实验室,在96孔板的每个孔中接种16,000个H9 胚胎干细胞源神经干细胞,并采用CultureOne添加剂分化2周后通常得到富集了的分化神经元约9000个,也就是神经干细胞起始数目的60%的数量。请注意,不同神经干细胞系的产量可能存在差异。
我们提供单独试剂形式的CultureOne添加剂,使您可轻松地搭配Gibco™神经细胞培养入门试剂盒,实现简单、易于扩展规模的出色神经元细胞培养。
订购信息
Catalog # | Name | Size | 单价 (CNY) | Qty |
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A3320201 | CultureOne™ Supplement (100X) | 5 mL | 1,885.00 |