点击图片查看原图

CCK-8细胞检测试剂盒(日本同仁)

产品价格: ¥1.00

最小起订量:暂无 可售数量:暂无

发货时限:
暂无
所在地区:
全国
有效期至:
长期有效
最后更新:
2020-10-05 02:00:01
浏览次数:
218

产品详情

品牌名称:

正规专用发票,签订正规销售合同,全国冷链运输,免费技术支持

CCK-8试剂盒 Cell Counting Kit-8 CK04

检测原理:

◆ Cell Counting Kit简称CCK8,(CCK-8/WST-8)试剂盒,是一种基于WST-8(化学名:2-(2-甲氧基-4-硝***基)-3-(4-硝***基)-5-(2,4-二磺基***)-2H-四唑单钠盐)的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。

锚点◆ WST-8属于MTT的升级产品,工作原理为:在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的锚点甲臜产物(formazan)。颜色的深浅与细胞的增殖成正比,与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450mM波长处测定OD值,间接反映活细胞数量。

锚点◆ CCK法应用非常广泛,如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。

CCK-8试剂盒 Cell Counting Kit-8 CK04    CCK方法的优势: 

锚点◆ 表1 CCK法与其他细胞增殖/毒性检测方法的优势比较

锚点检测方法

MTT

XTT

WST-1

CCK

甲臜产物的水溶性

差(需加有机溶剂溶解再检测)

产品性状

粉末

2瓶溶液

溶液

1瓶溶液

使用方法

配成溶液后使用

现配现用

即开即用

即开即用

检测灵敏度

很高

很高

检测时间

较长

较短

较短

最短

检测波长

560-600nm

420-480nm

420-480nm

430-490nm

细胞毒性

高,细胞形态完全消失

很低,细胞形态不变

很低,细胞形态不变

很低,细胞形态不变

试剂稳定性

一般

较差

一般

很好

批量样品检测

可以

非常适合

非常适合

非常适合

便捷程度

一般

便捷

便捷

非常便捷

锚点◆ 酚红和血清对CCK法的检测不会造成干扰;

◆ 细胞毒性非常低,因此加入WST-8显色后,可以在不同时间反复用酶标仪读数从而找到最佳测定时间。

CCK法的操作步骤(更多内容请见说明书):

实验一:细胞活性检测

1、在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)。将培养板放在培养箱中预培养(37℃,5% CO2)。

2、向每孔加入10 μL CCK溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。

3、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。

4、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。

5、锚点若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。锚点24小时内测定,吸光度不会发生变化。

实验二:细胞增殖-毒性检测

1、在96孔板中配置100μL的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(37℃,5% CO2)。

2、向培养板加入10μL不同浓度的待测物质。

3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6、12、24或48小时)。

4、向每孔加入10μL CCK溶液(注意不要再孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。

5、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。

6、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。

7、若暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定,吸光度不会发生变化。

注意:如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉药物影响。当然药物影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。

活力计算:

细胞活力*(%)=[A(加药)-A(空白)]/[A(0加药)-A(空白)] ×100A(加药):具有细胞、CCK溶液和药物溶液的孔的吸光度A(空白):具有培养基和CCK溶液而没有细胞的孔的吸光度A(0加药):具有细胞、CCK溶液而没有药物溶液的孔的吸光度*细胞活力:细胞增殖活力或细胞毒性活力

CCK-8试剂盒 Cell Counting Kit-8 CK04保存条件:

4℃避光保存一年有效,-20℃避光保存两年有效。

Cell Counting Kit-8(CCK-8试剂盒)是由同仁化学研究所(Dojindo)开发的检测细胞增殖、细胞毒性的试剂盒,为MTT法的替代方法,试剂盒中采用自己开发的水溶性四唑盐-WST-8,在美国,欧洲等国家地区均持有专利,同仁化学研究所于2006年在中国获得了WST-8的注册商标。 CCK-8法与普通的MTT法相比,具有显著特点:★灵敏度高,数据可靠,重现性好★操作简便,省时省力★水溶性,不需要换液,尤其适合于悬浮细胞★无需***性同位素和有机溶剂,对细胞毒性低★为1瓶溶液,毋需预制,即开即用★适合于高通量药物筛选CCK-8用途:药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验CCK-8试剂盒在国内知名科研院所、重点大学、三甲医院被广泛应用,国际认可度高,使用CCK-8发表的中外文献达600多篇,其中截止08年底SCI影响因子IF>10分的论文有37篇,最高IF26.5分[Heterozygosity with respect to Zfp148 causes complete loss of fetal germ cells during mouse embryogenesis,Nature Genetics 33, 172 - 176 (01 Feb 2003)] CCK-8试剂与MTT等方法灵敏度比较  CCK-8试剂毒性:CCK-8和其他检测方法对比可以得出——CCK-8对细胞几乎无毒性,不伤害细胞,细胞可重复利用  

免责声明

本网页所展示的有关【CCK-8细胞检测试剂盒(日本同仁)】的信息/图片/参数等由的会员【 】提供,由【生物实验采购网】会员【 】自行对信息/图片/参数等的真实性、准确性和合法性负责,本平台(本网站)仅提供展示服务,请谨慎交易,因交易而产生的法 律关系及法律纠纷由您自行协商解决,本平台(本网站)对此不承担任何责任。您在本网页可以浏览【CCK-8细胞检测试剂盒(日本同仁)】有关的信息/图片/价格等及提供 【CCK-8细胞检测试剂盒(日本同仁)】的商家公司简介、联系方式等信息。

在您的合法权益受到侵害时,请您致电,我们将竭诚为您服务,感谢您对【生物实验采购网】的关注与支持!

网站首页 | 关于我们 | 联系方式 | 使用协议 | 版权隐私 | 网站地图  |  排名推广  |  广告服务  |  积分换礼  |  网站留言  |  RSS订阅  |  违规举报
 
免责声明:本站有部分内容来自互联网,如无意中侵犯了某个媒体 、公司 、企业或个人等的知识产权,请来电或致函告之,本网站将在规定时间内给予删除等相关处理。