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基因敲除利器--TALEN克隆 |
靶向基因操作技术简介: TALEN (transcription activator-like effector nucleases)靶向基因操作技术是一种崭新的分子生物学工具。可以构建并表达可以识别任意DNA序列的重组核酸酶,实现目的基因的特异编辑,如knock-out,knock-in,碱基突变…… TALEN技术2011年被《Nature methods》评为“年度实验室技术”。 2011年7-8月,Nature Biotechnology 上发表了用TALEN 技术进行基因敲除的4篇研究文章,及一篇综述“Move over ZFN”。 - Genetic engineering of human pluripotent cells using TALE nucleases. 2011 Jul 7;29(8):731-4.
- Knockout rats generated by embryo microinjection of TALENs. 2011 Aug 5;29(8):695-6.
- Targeted gene disruption in somatic zebrafish cells using engineered TALENs. 2011 Aug 5;29(8):697-8.
- Heritable gene targeting in zebrafish using customized TALENs. 2011 Aug 5;29(8):699-700.
- Move over ZFN. Volume: 29, Pages: 681–684
继自杀质粒,RNA干扰、ZFN之后,TALEN技术已经成为生物技术发展史中新的里程碑!与ZFN技术相比,TALEN技术的优势明显。 技术名称 | ZFN | TALEN | 实验设计难易 | 复杂 | 简单 | 目标序列特异性 | 无法识别任意目标序列,且识别序列常受上 下游序列影响 | 可特异性针对任何序列,且特异性高 | 细胞毒性 | 较高 | 低 | 脱靶情况 | 11% | 1% | 实验周期 | 8个月(Sigma) | 2个工作日起(吉凯基因) | 实验费用 | 25,000美元以上 | 大幅降低 | 实验成功率 | ~10% | 高,单个基因可达95%以上 | Why choose TALEN? - 适用范围广:几乎可敲除任何基因,无基因序列、细胞、物种限制;
- 设计准确:TAL的核酸识别单元与A、G、C、T有恒定的对应关系,设计简单准确;
- 成功率高:成功率高达100%;
- 脱靶率低:毒性低、脱靶情况少。
- 供货期短:吉凯基因专有技术,2天提供针对特定基因的TALEN克隆;
- 超低成本:获得针对特定基因的talen,价值最低至2680元/gene,2013年2月1日前成为吉凯基因会员,更可以免费获得TALEN克隆。
TALEN技术应用 目前TALEN技术已成功应用于植物、细胞、酵母、斑马鱼及大、小鼠等各类研究对象。自2010年该技术首次报道至今,使用TALEN技术发表的SCI文章逐年递增,其中70%以上的文章影响因子大于5分。 TALEN应用案例 — 致病基因knockout - High-efficiency TALEN-based gene editing produces disease-resistant rice. Nature Biotechnology. 2012;30(390-392)
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