货号: | SY002 |
CAS号: | 9001-32-5 含量:>85(%)优级纯GR |
供应商: | 恒斐生物 |
数量: | 大量 |
英文名: | Fibrinogen,Fg |
保存条件: | -10℃保存 |
规格: | 100mg、1mg |
牛纤维蛋白原-用于凝血酶效价测定 含量:>85(%)
产品介绍:
纤维蛋白原(Fibrinogen,Fg),即凝血因子Ⅰ,来源于牛血浆。其分子量约340KD,由α、β、γ三对不同多肽链所组成,α-链分子量63.5 kDaβ-链分子量56 kDaγ链分子量47 kDa (约含4%碳水化合物)。多肽链间以二硫键相连。在凝血酶作用下,α链与β链分别释放出A肽与B肽,生成纤维蛋白单体。在此过程中,由于释放了酸性多肽,负电性降低,单体易于聚合成纤维蛋白多聚体。但此时单体之间借氢键与疏水键相连,尚可溶于稀酸和尿素溶液中。进一步在Ca2+与活化的ⅩⅢ因子作用下,单体之间以共价键相连,则变成稳定的不溶性纤维蛋白凝块,完成凝血过程。纤维蛋白原溶液在50℃以上变性,因此加热温度不宜超过50℃;另外,纤维蛋白原一般应采用37℃的生理盐水溶解,溶解时温度不宜过低,在4℃条件下以及不含盐的溶液中较难溶解。
纤维蛋白原在凝血酶效价测定中的应用
凝血酶效价测定方法:按照《中国药典》2010年版二部1149页进行。
1、纤维蛋白原溶液的制备 称取纤维蛋白原(批号F20130401,自制,可凝固蛋白含量为53.6%)47mg,加0.9%氯化钠溶液25ml,置于37℃水浴中溶解。
2、标准品溶液的制备 取凝血酶标准品,加0.9%氯化钠溶液溶解并分别稀释制成每1ml中含10单位、8单位、6.4单位和5单位的溶液。
3、测定 取试管(1cm*10cm)25支,置于37℃水浴中,分别加入纤维蛋白原溶液0.9ml,保温5分钟,再分别加入上述4种浓度的标准品溶液0.1ml,立即摇匀并计时,记录纤维蛋白的初凝时间,每种浓度的标准品溶液测定5次。以标准品溶液浓度的对数为横坐标,凝固时间平均值(秒)的对数为纵坐标,进行直线回归,计算相关系数。
4、实验结果 见表1和图1。
表1、凝血酶效价测定实验结果
浓度 (单位/ml) | 凝固时间(秒) | 平均凝固时间 (秒) | RSD% | 浓度对数 | 时间对数 | ||||
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | |||||
10.00 | 30.94 | 31.90 | 31.35 | 30.75 | 31.69 | 31.33 | 1.55 | 1.0000 | 1.4959 |
8.00 | 36.19 | 36.59 | 36.03 | 37.69 | 36.10 | 36.52 | 1.89 | 0.9031 | 1.5625 |
6.40 | 42.18 | 43.47 | 42.66 | 42.05 | 41.84 | 42.44 | 1.53 | 0.8062 | 1.6278 |
5.00 | 50.91 | 49.19 | 49.00 | 48.13 | 49.75 | 49.40 | 2.08 | 0.6990 | 1.6937 |
5、分析 采用自制纤维蛋白原,按照《中国药典》2010年版凝血酶冻干粉质量标准中的效价测定方法进行实验,结果显示自制纤维蛋白原符合实验要求,可以用来测定凝血酶的效价。