货号: | N712 |
规格: | 12rxn/24rxn/96rxn |
Single Cell Full Length mRNA-Amplication Kit
- 模板起始量低:单个细胞或10pg Total RNA即可作为起始模板,进行高效扩增
- 扩增灵敏度高:使用LNA技术及精心优化的反应体系,提高低表达基因的检出量
- 产物完整性好:通过双端引物扩增全长cDNA,获得全转录组信息,避免了5'和3'偏好性
单个293T细胞和10 pg Total RNA分别扩增18个循环,取1 µl纯化后的cDNA扩增产物使用Agilent 2100 Bioanalyzer进行检测,扩增产物分布于400-10000 bp,文库的peak位于2000 bp 左右;无模板阴性对照无产物。
Single Cell Full Length mRNA Amplication Kit能以1-500个细胞或10 pg-10 ng总RNA为模板,以Oligo(dT) VN Primer 为逆转录引物进行cDNA的合成,并且利用逆转录酶Sc Reverse Transcriptase的Template-switching活性在cDNA的3’端添加一段接头序列,通过该接头序列进行后续PCR扩增以获得全长cDNA扩增产物。有效避免了cDNA合成过程中的3’偏好性和rRNA的污染,对获得的全长cDNA扩增产物进行测序分析可以得到基因表达差异、可变剪接、融合基因等遗传调控信息。
Single Cell Full Length mRNA Amplication Kit ,兼容样品体积可控制为2.5 μl。一般情况下,一个反应可以产生2-20 ng的cDNA扩增产物。