货号: | KR202 |
规格: | 20 μl×25 次/20 μl×100 次 |
产品简介
lnRcute lncRNA cDNA第一链合成试剂盒是专门针对长链非编码RNA (lncRNA) 反转录而开发的产品。与mRNA相比,lncRNA具有丰度低、GC含量差异大、二级结构更复杂等特性,传统反转录试剂对lncRNA难以达到理想的效果。本试剂盒含有高效去除基因组DNA的gDNase,通过42℃,3 min即可去除RNA样品中残留的基因组DNA,可有效避免残留的基因组DNA对后续PCR检测结果的干扰。本试剂盒中lnR RT Enzyme Mix中使用的反转录酶为FastKing RT Enzyme,此酶是通过分子改造后的新型反转录酶,特别增加了疏水motif,具有更强的RNA亲和性和热稳定性,从而进一步提高了其反转录效率和反应速率,42℃、15 min即可完成cDNA第一链的合成,且反转录长度至少可达10 kb。另外,新型酶与RNA亲和力的更强,配合特殊优化过的缓冲体系和引物体系,使本试剂盒在通读GC含量高,二级结构复杂,低丰度的RNA模板和抗逆性等方面表现突出,特别适合表达水平相对较低,二级结果相对复杂的lncRNA的反转录反应。
产品特点
● 性能卓越:反转录效率可达95%以上,Total RNA最低检测下限可达10 ng,反转录长度可达10 kb以上。
● 简单快速:反应体系配制简单,21 min完成lncRNA cDNA第一链的合成;
● 适用广泛:能够通用于GC含量差异大,二级结构复杂,低丰度的RNA模板;对不同物种来源及杂质较多的RNA模板的适用性高;
● 兼容性好:后续配合荧光定量检测产品,灵敏度高、稳定性好。
实验例
实验例1. 提取拟南芥总RNA,分别使用TIANGEN KR202+FP402 及国外A 公司提供的解决方案 ( 使用mRNA反转定量试剂) 检测lncRNA COOLAIR,展示扩增曲线、熔解曲线、标准曲线和Ct 值。结果显示,TIANGEN lncRNA 专属检测试剂扩增Ct 靠前,特异性高,梯度优秀,优于竞争公司的mRNA 通用试剂。NTC:阴性对照。ND:未检出。
实验例2. 分别提取人类(左)、小鼠(中)和大鼠(右)总RNA,分别使用TIANGEN KR202+FP402(蓝色线)及国内B 公司提供的解决方案(使用mRNA 反转定量试剂,红色线)检测lncRNA ( 人类:HEIH,小鼠:NONMMUT000882,大鼠:NONRATT000076),展示扩增曲线和熔解曲线。结果显示,TIANGEN lncRNA 专属检测试剂扩增Ct 靠前,特异性高,具有良好的物种普适性,优于竞争公司的mRNA 通用试剂。