货号: | X10066 |
规格: | 8000U/800U |
储存条件:-20℃
热失活:80℃,20min
产品购买咨询:18511897367
简介:
Bst DNA据聚合酶是从Geobacillus中克隆得到的耐热DNA聚合酶。本产品缺失了5’-3’和3’-5’的核酸外切酶活性,比传统链置换酶具有更强的链置换活动,从而使得本产品在等温扩增实验中表现更加的出色。本产品是通过大肠杆菌表达的重组酶,分子量大小为67kDa。
单位定义:
1单位活力定义为在65℃,30min内,将25nmol dNTP掺入到酸不溶物质中所需要的酶量。
酶保存液成分:
10mM Tirs-HCl,50mM KCl,0.1mM EDTA,50%甘油,pH7.1@25℃。
产品特点:
- 热稳定性高,最适反应温度为50-68℃。
- 抗逆性好,对非离子表面活性剂和高盐环境的耐受性高。
- 链置换活性高,无核酸外切酶活性。
蛋白纯度:>99%
酶活性:5000U/mg。
宿主核酸残留:2000U酶中,未检出
单链核酸外切酶:2000U酶中,<2.0%
双链核酸外切酶:2000U酶中,<0.5%
双链核酸内切酶:2000U酶中,未检出
应用范围:
- 在二代测序(NGS)应用中,主要用于文库构建中的链置换反应。
- 其他等温扩增实验
- 应用于在纳克数DNA模板量条件下对其测序
- 应用于在GC含量较高DNA区域测序
名称 | 规格1 | 规格2 | 规格3 | 其他 |
Bst DNA聚合酶 | 1600U | 8,000U | 80,000U | 可定制 |
10*Bst Reaction buffer | 0.7ml | 3ml | 30ml | |
100mM MgSO4 Solution | 0.5ml | 2ml | 20ml |
20mM Tris-HCl ;10mM (NH4)2SO4 ;50mM KCl ;2mM MgSO4 ;0.1% Tween® 20 ;pH 8.8 @ 25℃
注:镁离子的反应浓度可在2-10mM之间调整。
使用方法:
成分 | 25ul体系 | 终浓度 |
10*Bst Reaction buffer | 2.5ul | 1×(包含2mM MgSO4 ) |
100mM MgSO4 Solution | 1.5ul | 6mM(总量8mM) |
dNTP mix(10nM) | 3.5ul | 1.4mM each |
primer-1(25×) | 1ul | |
primer-2(25×) | 1ul | |
primer-3(25×) | 1ul | |
primer-4(25×) | 1ul | |
Bst DNA聚合酶 | 1ul | 320U/ml |
DNA template | >10copies | |
Nuclease-free Water | To25ul |
- 设置无模板阴性对照,保证扩增特异性。
- 对反应产物进行分析时,建议建立分离区域以避免污染。
- 若需要体系优化,请保证在Mg2+浓度在4-10mM之间,Bst酶浓度在40-320U/ml之间,反应温度在50-68℃之间。
- Bst DNA聚合酶不能用于热循环测序和PCR。
- Bst DNA聚合酶缺失5’-3’和3’-5’的核酸外切酶活性。