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图尔思 磁珠-Protein G
耐碱蛋白A琼脂糖凝胶4FF亲和层析介质
植物微粒体蛋白抽提MM-018
[VIP第1年] 指数:3
通过广州市黄埔区市场和质量监督管理局认证 
重组蛋白G预装柱/填料
温敏培养表面产品
CellDETACH温敏培养板
5/10毫升血清移液管
细胞培养皿
真空过滤器
JET BIOFIL 细胞培养| 货号： | PAC000001 |
| 保存条件： | 2-8度 |
重组蛋白A预装柱/填料
技术指标：每毫升rProtein G结合30-55mg人血清IgG，22-45mg兔IgG /ml填料，
技术指标：每毫升rProtein G结合30-55mg人血清IgG，22-45mg兔IgG /ml填料，
4-12mg鼠血清IgG/ml填料，4-13mg鼠腹水IgG/ml填料
本产品采用“高配基、高浓度、小体积”的创新偶联技术，将填料中有限的羟基(-OH)结合位点充分活化，使得单位体积中结合更多蛋白A，最终纯化效率较普通偶联有30%的提高。蛋白A偶联填料可直接用于血清、腹水中IgG抗体纯化，或用于含Fc片段的重组蛋白的纯化。
rec-Protein A分子量：34.85 KDa
每分子rec-Protein A可结合IgG位点数：4个
rec-Protein A可结合白蛋白位点数：无
线性流速：300-500 cm/h
耐压指数：≤0.3 MPa（填料）
1. 将血清或腹水样品（推荐上样量2 mL样品/mL柱）装入截留分子量3.5 KDa透析带中，于4 ℃冰箱中对1× PBS（pH 7.4）透析过夜；
2. 将rec-Protein A-Sepharose装柱固定好，用10倍柱体积1× PBS（pH 7.4）平衡层析柱，建议流速为1 mL/min；
3. 将透析好的样品从层析柱上端加入，建议流速为1 mL/min，为了获得更好的抗体结合效果可将流穿液再上样，重复2遍（或将样品1次性加入层析柱后置于摇床上，轻轻摇动，结合30 min）；
4. 样品结合后，用20倍柱体积1× PBS(pH 7.4)洗涤层析柱，建议流速为1 mL/min，勿让层析柱滴干；
5. 洗脱IgG，向层析柱上端加入洗脱液（100 mM甘氨酸，pH 2.7），用预先加有100 μL中和缓冲液（1M Tris，pH 9.0）的4 mL Ep管接收，2 mL /管，共收集10倍柱体积，进行10 % SDS-PAGE电泳，确定IgG样品所在管，回收样品。
6. 用5倍柱体积再生缓冲液（100 mM甘氨酸，pH 2.0）进行再生处理，再加入10倍柱体积ddH2O清洗层析柱。最后于层析柱中加入10倍柱体积, 20% Ethanol，4~8 ℃冰箱保存处理。
- 产品简介
本产品采用“高配基、高浓度、小体积”的创新偶联技术，将填料中有限的羟基(-OH)结合位点充分活化，使得单位体积中结合更多蛋白A，最终纯化效率较普通偶联有30%的提高。蛋白A偶联填料可直接用于血清、腹水中IgG抗体纯化，或用于含Fc片段的重组蛋白的纯化。
- 产品技术指标
rec-Protein A分子量：34.85 KDa
每分子rec-Protein A可结合IgG位点数：4个
rec-Protein A可结合白蛋白位点数：无
线性流速：300-500 cm/h
耐压指数：≤0.3 MPa（填料）
- 注意事项
- 产品保存
- rec-Protein A预装柱纯化IgG抗体步骤
1. 将血清或腹水样品（推荐上样量2 mL样品/mL柱）装入截留分子量3.5 KDa透析带中，于4 ℃冰箱中对1× PBS（pH 7.4）透析过夜；
2. 将rec-Protein A-Sepharose装柱固定好，用10倍柱体积1× PBS（pH 7.4）平衡层析柱，建议流速为1 mL/min；
3. 将透析好的样品从层析柱上端加入，建议流速为1 mL/min，为了获得更好的抗体结合效果可将流穿液再上样，重复2遍（或将样品1次性加入层析柱后置于摇床上，轻轻摇动，结合30 min）；
4. 样品结合后，用20倍柱体积1× PBS(pH 7.4)洗涤层析柱，建议流速为1 mL/min，勿让层析柱滴干；
5. 洗脱IgG，向层析柱上端加入洗脱液（100 mM甘氨酸，pH 2.7），用预先加有100 μL中和缓冲液（1M Tris，pH 9.0）的4 mL Ep管接收，2 mL /管，共收集10倍柱体积，进行10 % SDS-PAGE电泳，确定IgG样品所在管，回收样品。
6. 用5倍柱体积再生缓冲液（100 mM甘氨酸，pH 2.0）进行再生处理，再加入10倍柱体积ddH2O清洗层析柱。最后于层析柱中加入10倍柱体积, 20% Ethanol，4~8 ℃冰箱保存处理。
同类产品纯化效果比较
美国某知名品牌的rProtein A Sepharose 4FF 亲和层析柱对人血清进行纯化，其对人IgG的最大结合量约为34 mg/mL Medium。
表1 rProtein A与不同来源Ig的反应活性情况
| IgG类型 | Protein A | IgG类型 | Protein A | IgG类型 | Protein A |
| 人 IgG1 | ++++ | 小鼠 IgG2b | +++ | 仓鼠 Ig | + |
| 人 IgG2 | ++++ | 小鼠 IgG3 | ++ | 豚鼠 Ig | ++++ |
| 人IgG3 | - | 小鼠 IgM | +/- | 牛 Ig | ++ |
| 人IgG4 | ++++ | 大鼠 IgG1 | - | 马 | ++ |
| 人IgA | ++ | 大鼠 IgG2a | - | 奶牛 | ++ |
| 人n IgD | ++ | 大鼠 IgG2b | - | 猪 | +++ |
| 人IgE | ++ | 大鼠 IgG2c | + | 绵羊 | +/- |
| 人 IgM | ++ | 大鼠 IgM | +/- | 山羊 | - |
| 小鼠 IgG1 | + | 兔 Ig | ++++ | ||
| 小鼠 IgG2a | ++++ | 鸡 Ig | - |
| 特性 | rProtein A | 特性 | rProtein A |
| 柱体积规格 | 1mL，5mL | 填料稳定性 | ＞20纯化周期 |
| 基质组成 | 4%高交联度琼脂糖 | pH稳定性 | pH 2~11 |
| 基质平均粒径 | 90μm | 推荐工作pH范围 | pH 3~10 |
| 功能基团 | rProtein A：34.85kDa； IgG结合位点：4 | 推荐在位清洗pH范围 | pH 2~11 |
| 配基密度 | ≈3mg rProtein A/mL 基质 | 工作温度 | 4~40℃ |
| 结合能力 | 30-55mg人IgG/mL填料 | 运输条件 | 20%乙醇浸泡，室温运输 |
| 推荐流速 | 30~150cm/mL | 贮藏条件 | 20%乙醇条件下， 4~8℃保存 |
重组蛋白A预装柱
| 目录号 | 规格(ml) | 备注说明 |
| PAC000001 | 1 | 手动 |
| PAC000005 | 5 | 手动 |
| PAC100001 | 1 | 自动 |
| PAC100005 | 5 | 自动 |
重组蛋白A填料
| 目录号 | 规格(ml) |
| PAC001005 | 5 |
| PAC001025 | 25 |
| PAC001100 | 100 |
温馨提示：不可用于临床治疗。
