点击图片查看原图
Hydrogen peroxide solution双氧水过
槽式翻堆机--养护细则
1-(2-吡啶偶氮)-2-萘酚
[VIP第1年] 指数:2
通过海淀分局认证 
SimplyP总RNA提取试剂
二氢睾酮（双氢睾酮）
SLC2A4 Polyclonal An| 货号： | EXFT10A-1 |
| 供应商： | 北京博迈斯 |
| 英文名： | Exo-Fect Exosome Transfection Kit |
只需要将目的核酸与Exo-Fect转染试剂、分离到的exosome简单混合，就能形成exosome核酸运载复合体。整个转染过程简单，不到1小时即可完成核酸高效转染入exosome过程！
△产品及包装信息：
| Catalog | Product | Size | Exo-Fect Reagent | Positive Control siRNA (TX-Red) | ExoQuick-TC | |
| EXFT10A-1 | Exo-Fect Exosome Transfection Kit | 10 rxns | 100 ul | 200 ul | 500 ul | 2769.00 |
| EXFT20A-1 | Exo-Fect Exosome Transfection Kit | 20 rxns | 200 ul | 400 ul | 1000 ul | 4970.00 |
△使用方法：
Exosome样本准备
从血清或培养基上清中分离exosome（使用SBI ExoQuick, ExoQuick-TC或者超速离心法），500 ul无菌1x PBS重悬exosome沉淀。建议单个反应exosome蛋白总量为50 - 300 ug（约1x10^6 exosomes）。
Exosome转染实验
1. 准备接近的1.5ml EP管，如下混合:
10 ul Exo-Fect solution
+ 20 ul 核酸 (20 pmol si/miRNA, 1 ug mRNA 或 5 ug plasmid DNA)
70 ul 无菌 1x PBS
50 ul 无菌1x PBS重悬好的exosome
= 150 ul 转染反应体系
2. 轻弹或颠倒EP管3次以混匀反应体系，不可涡旋。
3. 将EP管置于37℃混合器孵育10min后，立即置于冰上。
4. 终止反应：在转染反应体系中加入试剂盒提供的ExoQuick-TC 30 ul，上下颠倒6次以混匀，，不可涡旋。
5. 将EP管置于冰上（或4℃）孵育30min。
6. 最高转速13,000-14,000 rpm离心3min。
7. 弃去上清，300ul 1x PBS重悬转染好的exosome沉淀。
8. 转染好的exosome可用于添加入靶细胞，或者其他体内试验。
将Exo-Fect转染的exosome加入靶细胞
1. 6孔板每孔使用去exosme的FBS培养约为1x10^5个细胞，添加至少150 ul 转染好的exosome。可根据实验需求调节添加比例。
2. 继续细胞培养2-24小时，根据使用的荧光染料及荧光显微镜操作说明，在荧光显微镜下观察。阳性对照Texas Red-labeled siRNA，使用荧光显微镜上标准RFP滤镜设置可观察其通过exosome运输至靶细胞的过程。
△参考数据
Exo-Fect试剂盒可用于转染小RNAs (si/miRNAs)，较长的mRNAs，甚至质粒DNA至完整的exosome中！
将转染好的exosome处理靶细胞，24-48小时后拍照：
左图：Texred荧光标记的siRNA转染exosome后，将转染好的exosome处理靶细胞HEK293
中图：编码RFP的mRNA成功转染exosome后，将转染好的exosome处理靶细胞HEK293
右图：编码GFP的质粒DNA成功转染exosome后，将转染好的exosome处理靶细胞HEK293
温馨提示：不可用于临床治疗。
