货号: | 80103S 80103L 80124S 80124L 80124XL |
HotStart Taq DNA聚合酶是一种创新型的抗体修饰的热启动酶。该酶在室温下活性被完全封闭,避免了在样品准备及第一循环反应升温阶段产生非特异性扩增和引物二聚体,增加DNA扩增的特异性。加热到70℃时,结合在酶上的抗体迅速失活,且不会影响之后的Taq DNA聚合酶反应。
使用抗体的热启动法,与化学修饰热启动法不同,无需长时间的变性步骤,具有在第一循环的变性步骤中即可完全失活的优点,该酶具有特异性好、灵敏度高、重复性好、扩增效率高等优点。
1、活性单位定义: 70℃条件下,30分钟内将10nmol脱氧核糖核苷酸(dNTPs)合成多聚核苷酸所需的酶量定义为1个活性单位。
2、保存液: 50mM Tris-HCl (pH 8.0), 100mM KCl, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 0.5%(v/v)NP-40, 0.5%(v/v)Tween-20, 50%(v/v)Glycerol
3、贮存条件:-20℃.
4、纯度:无核酸酶污染。
5、HotStart Standard Reaction Buffer(10×,不含Mg2+):200mM Tris-HCl (pH8.8 at 25℃), 200mM KCl, 50mM (NH4)2SO4,0.5%(v/v)Tween-20, 0.5%(v/v)NP-40.
6、失活或是抑制
- 低浓度的尿素、甲酰胺、二甲基甲酰胺(DMF)和二甲基亚砜(DMSO)对HotStart Taq DNA聚合酶的活性无抑制;
- 较高浓度的非离子表面活性剂如Tween-20、NP-40和Triton X-100(>5%)能抑制HotStart Taq DNA聚合酶的活性;
- 极低浓度的离子表面活性剂如脱氧胆氨酸钠(<0.06%),十二烷基肌氨酸钠(<0.02%),十二烷基硫酸钠(SDS,<0.01%)几乎完全抑制HotStart Taq DNA聚合酶活性;
- 酚/氯仿抽提可使HotStart Taq DNA 聚合酶丧失活性。
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