货号: | S-2001 |
供应商: | 祥生兴业 |
英文名: | Super GelRed, 10,000× in water |
规格: | 0.5 ml |
Super GelRed是一种高灵敏、低毒性和超安全的荧光核酸凝
胶染色试剂。它可替代溴化乙锭(EtBr,EB),并且拥有远高于
EB的灵敏度,同时不需要脱色。由于Super GelRed和EB有相同
的光谱特性,因此用它替代EB时不需要更换成像系统。
使用方法
1.胶染法(用法同EB)
(1)制胶时加入Super GelRed核酸染料
(例如:每50 mL琼脂糖溶液中加入5 μL Super GelRed
10,000×储液,以此比例类推)。
(2)按照常规方法进行电泳。
注意事项:
此方法染色染料用量相对较少,500 μL染料大约可以做100块
50 mL的胶。
由于Super GelRed具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖
溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡或者翻转
以保证染料充分混匀。也可以选择将Super GelRed储液加到琼
脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热
以制备琼脂糖凝胶。Super GelRed兼容所有常用的电泳缓冲溶
液。
含有染料的预制凝胶溶液可以大量制备,并长期保存直到使
用。
此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请
使用泡染法。
2.泡染法
(1)按照常规方法进行电泳。
(2)用H2O将Super GelRed 10,000×储液稀释约3,300倍到
0.1 M NaCl中,制成3×染色液。(例如将15 μL Super
GelRed 10,000×储液和5 mL 1 M NaCl加到45 mL H2O
中)。
(3)将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中,缓慢
加入足量的3×染色液浸没凝胶,室温振荡染色30 min左右,最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。
对于含3.5~10%丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于30
min到1 h,并随丙烯酰胺含量增加而延长。
注意事项:
用泡染法染色时,染料用量较多,单次使用的染色液可重复
使用3次左右。
3×Super GelRed染色液可以大量制备,在室温下避光保存
直至用完。
注:1、如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染
法染色以确认问题是否与染料有关。
2、如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关,
请尝试:降低琼脂糖浓度、选用更长的凝胶、延长凝胶时间
以保证边缘清晰、改进上样技巧或选择泡染法染色。
Super GelRed和EtBr实验对比图
Super GelRed和EB在TBE缓冲液配制的1%琼脂糖凝胶中进行电
泳后,胶染法染色结果比较。分别使用Invitrogen 1Kb Plus
DNA Ladder(左到右200、100、50、25 ng)上样,凝胶
成像使用300 nm激发的紫外凝胶成像系统。