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动物模型制作技术服务（裸鼠成瘤及各
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人源肿瘤成瘤实验服务| 提供商： | 武汉云克隆诊断试剂研究所 |
| 服务名称： | 小鼠肾纤维化模型 |
| 规格： | 只 |
小鼠肾纤维化模型
肾积水(hydronephrosis)是指尿液从肾盂排出受阻，蓄积后肾内压力增高，肾盂肾盏扩张，肾实质萎缩，导致肾功能减退。梗阻性肾病其主要的病理生理改变是肾积水、肾盂及肾小管压力升高、肾间质水肿、炎性细胞浸润、肾间质内成纤维细胞增生、肾间质胶原蛋白聚集、肾间质增宽、肾小管萎缩，最终导致肾间质纤维化和肾单位减少，引起肾功能衰竭。
单侧输尿管梗阻是比较成熟的肾间质纤维化模型，结扎2周就可有成纤维细胞的增生和间质细胞外基质的生成。但是由于输尿管的结扎使患侧肾盂中的尿液不能外排，加上对侧肾脏的代偿作用，所以一般情况模型组血肌酐、尿素氮、NAG以及24h尿蛋白仅明显高于正常组，但还处于正常范围之内，同时对侧肾一般也无明显改变，而患侧肾脏组织中大量炎症细胞浸润、肾小管和间质的结构严重破坏以及肾间质纤维化，最后肾间质呈现广泛的纤维化，而肾小球几乎没有病变。因此单侧输尿管梗阻模型在研究肾间质纤维化方面使研究的靶点明确，有利于其病变机理及抗间质纤维化治疗的研究。
1.实验动物
SPF级Balb/C小鼠，健康，雄性，4~6W，体重为18g~20g。
2.实验分组
实验随机分组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组，每组15只动物。
3.实验周期
7d，14d，21d，28d
4.建模方法
4.1 小鼠3%戊BA比妥钠80mg/kg腹腔麻醉后侧卧，左侧背部脱毛
4.2 在大腿上方脊椎左侧1cm处开口，剪开皮肤及肌肉，
4.3 分离出左侧输尿管，在其上1/3处游离输尿管，6号线结扎2道，在其间剪断输尿管，清理伤口后分两层缝合，待小鼠清醒后，将其放回洁净笼具后放回饲养室饲养，定期观察小鼠状态及死亡情况并做好记录。
4.4 在模型建立后7d，14d，21d，28d分别处死小鼠，取左侧部分肾组织于4%多聚甲醛溶液固定，石蜡包埋；其余肾组织液氮冷冻，-80度保存。
5.模型的评价
5.1 蛋白尿含量、尿NAG活性测定 模型组术后2周、4周的24h尿蛋白含量以及尿酶NAG活性比正常组和假手术组明显上升。
5.2 血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)含量测定 手术4周后，模型组血清Scr和BUN含量相对于正常组和假手术组有稳定的升高。
5.3 形态学观察：术后取左肾于4%多聚甲醛固定，依次脱水、透明、石蜡包埋、切片。做HE染色及Masson染色，光镜观察肾小球、肾小管-间质的病理变化及炎性细胞浸润情况。可见模型组小鼠的肾间质出现炎症细胞浸润，肾小管上皮细胞萎缩、刷状缘消失、肾小管管腔扩张呈囊状，管腔塌陷，间质明显增宽，间质内可见大量炎性细胞浸润，伴有较多的成纤维细胞增生。并随时间的延长炎症细胞浸润加重，小管上皮细胞扁平、脱落，肾小管萎缩、扩张加重，甚至塌陷、消失，胶原纤维增生，间质纤维化加重。
6.注意事项
6.1 分离输尿管时注意不要损伤肾脏。
6.2 注意清理伤口，防止感染。
6.3 取下肾脏后要剥离肾表面的结缔组织薄膜。
图1 肾脏大体图（左边为未结扎侧肾，右边为输尿管结扎侧肾，肾实质已发生严重萎缩）
图2 正常小鼠。肾小球、 肾小管及肾间质结构正常(HE染色)
图3 肾纤维化小鼠。肾小管管腔扩张呈囊状，管腔塌陷，间质明显增宽，纤维化显著，间质内可见大量炎性细胞浸润(HE染色)
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