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小鼠内皮素-1(mouse Endothelin-1)
动物活体实验
小鼠干扰素-b (mouse IFN-b)
通过武汉市工商行政管理局沌口分局认证 
膀胱上皮细胞(BEC)
智能微孔板清洗机（智
Protein A/G 纯化柱
人源肿瘤成瘤实验服务| 提供商： | 武汉云克隆诊断试剂研究所 |
| 服务名称： | 小鼠明矾OVA致哮喘模型 |
| 规格： | 只 |
小鼠明矾OVA致哮喘模型
哮喘是一种由多种炎症细胞及炎症介质参与的气道慢性炎症性疾病，气道炎症、平滑肌功能紊乱和气道重塑是哮喘的主要病理改变，发病率呈逐年增加趋势。
现已发现有多种细胞因子参与哮喘发病的调控，其中关于Th1/Th2类细胞因子失衡学说为目前的研究热点。IFN-γ、IL-4分别是Th2、Th2细胞的特征性细胞因子，在哮喘的发病机制中，IFN-γ和IL-4的不平衡是引起IgE产生异常和哮喘发病的重要因素，调节Th1细胞因子活性或抑制Th2细胞因子已成为哮喘防治探讨的新热点。最新的研究发现在抗原刺激后气道上皮可以使前炎性细胞因子 IL-25 表达增加，促使 IL-4 及 IL-13等 Th2 细胞因子过量表达。
1.实验动物
SPF级Balb/C小鼠，雄性，周龄为4w~6w，体重为20g~22g。
2.实验分组
实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组，每组15只动物。
3.主要试剂
卵蛋白（OVA）
明矾
4.实验周期
6W
5.建模方法
5.1 明矾致敏佐剂：10%明矾溶液（溶于双蒸水）2ml与500ug/ml OVA（溶于PBS）2ml等量混合后，用NAOH调PH值为6.5，室温孵育60min，750r/min，离心5min，去掉上清液，重溶于2ml PBS。致敏时每只小鼠腹腔注射200ul，其中含2mg明矾和100ug OVA。
5.2 致敏：小鼠分别于第0、14天时腹腔注射明矾致敏佐剂0.2ml，对照组注射相同剂量的PBS溶液，正常饮食饲养。
5.3 激发：雾化吸入，第21天时小鼠放入有机玻璃箱，5% OVA雾化吸入。每天30min，共7d，最后一次致敏后24h内检测。以小鼠出现烦躁不安、呼吸急促、腹肌痉挛等阳性反应作为造模成功的标准。对照组采用PBS雾化吸入，其他操作均相同。
5.4 末次激发24h麻醉小鼠，摘眼球取血，室温静置2h后于4℃3000r离心10分钟提取血清，放入-80冰箱冻存。取左肺组织于4%多聚甲醛溶液中固定用于病理染色；右肺组织液氮冷冻，-80℃保存用于分生标本。
6.模型评估
6.1 一般观察 哮喘模型组大鼠在激发开始后出现打喷嚏、点头呼吸、呼吸急促、哮鸣音、腹肌收缩、烦躁等典型哮喘发作症状，并且后期观察中发现饮食减少、毛色无光泽、行动迟缓及体重逐渐下降。
6.2 支气管肺泡灌洗液(BALF)的收集最后1次激发24 h后(第28天)将各组小鼠颈椎脱臼处死,无菌条件下分离气管,结扎左主支气管后,剪开右主支气管插入气管导管并固定,无菌生理盐水灌洗3次, 1mL/次,收集的BALF于4℃1200 r.min-1离心5 min,弃去上清液, PBS重悬细胞沉淀并涂片,进行细胞分类。
6.3 肺组织病理学
取左肺组织用4%多聚甲醛固定、脱水、石蜡包埋， 4μm切片，HE染色。正常组支气管无明显炎症细胞浸润，结构正常。哮喘组可见弥漫性细小支气管和血管周围炎性细胞浸润，其中嗜酸细胞显著增多。气道上皮有不同程度脱落，支气管豁膜上皮杯状细胞增生，管腔内可见豁液栓及炎性渗出，支气管平滑肌显著增厚，血管周围水肿。
6.4 细胞因子的检测
模型组血清中IL-25、IL-4的含量显著高于对照组。采用ELISA试剂盒检测血清中IL-25、IL-4的含量。
图1 小鼠哮喘模型雾化激发
图2 正常小鼠。肺支气管、血管及肺泡（↑）(HE染色)
图3 哮喘小鼠。肺泡塌陷，间隔增宽，部分肺泡扩张（↑）(HE染色)
图4 哮喘小鼠。血管壁显著增厚，周围炎性细胞浸润，其中嗜酸细胞显著增多（↑）(HE染色)
其他动物疾病模型请参见：
小鼠肺栓塞模型
小鼠脑缺血模型
小鼠肾纤维化模型
小鼠乙酸诱导肠炎模型
小鼠子宫内膜异位模型
小鼠明矾OVA致哮喘模型
小鼠肝脏缺血再灌注损伤模型
小鼠肾脏缺血再灌注损伤模型
STZ诱导的小鼠糖尿病模型
小鼠卵巢去势致骨质疏松症模型
CCl4诱导的小鼠肝脏纤维化模型
刀豆蛋白A(Con A)诱导的小鼠肝炎模型
大鼠脑缺血模型
大鼠肾纤维化模型
大鼠深静脉血栓模型
大鼠乙酸诱导肠炎模型
STZ诱导的大鼠糖尿病模型
佐剂诱导的大鼠关节炎模型
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脂多糖（LPS）诱导的大鼠肺炎模型
大鼠盲肠结扎穿孔术（CLP）致脓毒症模型
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