点击图片查看原图
EZ-CasTM CRISPR-Cas9斑马鱼基因敲入
金银花提取物绿原酸
通过武汉市工商行政管理局沌口分局认证 
膀胱上皮细胞(BEC)
智能微孔板清洗机（智
Protein A/G 纯化柱
人源肿瘤成瘤实验服务| 提供商： | 武汉云克隆诊断试剂研究所 |
| 服务名称： | 大鼠肾脏缺血再灌注损伤模型 |
| 规格： | 只 |
大鼠肾脏缺血再灌注损伤模型
缺血再灌注损伤(IRI)是器官移植、休克、动脉搭桥术后等普遍存在的问题。肾脏是发生IRI极为常见的器官之一，尤其肾移植，不可避免的要经历一定程度的IRI,肾脏缺血再灌损伤是急性肾衰的常见原因。对麻醉动物的肾动脉进行阻断和再通后，可引起肾脏缺血再灌注损伤。在缺血再灌注过程中，钙超载、线粒体能量合成障碍、氧自由基的增多等因素导致肾小管内皮细胞脱落，肾脏组织结构的破坏进而使肾脏功能发生障碍。
1.实验动物
SPF级SD大鼠，雄性，体重为220g~250g。
2 实验分组
实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组，每组15只动物。
3.模型周期
24h、72h
4.建模方法
4.1 选取250g左右大鼠，术前禁食12h，自由饮水。
4.2 15％水合氯醛(350mg／kg)腹腔注射麻醉,大鼠背部去毛，消毒备皮。
4.3 在背部脊椎旁1cm、肋骨下缘1cm处剪开皮肤及肌肉，可见到肾脏, 小心分离出两侧肾脏的肾动脉，迅速用动脉夹夹闭两侧肾动脉。
4.4 缺血60min后松开动脉夹，恢复血流，观察肾脏恢复情况。
4.5 分两层缝合开口,待大鼠清醒后，将其放回洁净笼具后放回饲养室饲养，定期观察大鼠状态及死亡情况并做好记录。
4.6 对照组不做缺血处理，其他操作相同。
4.7 分别取再灌注0h、3h、6h、12h、24h、72h六个时间点取材。麻醉大鼠，下腔静脉取血，室温静置2h后于4℃3000r离心10分钟提取血清，放入-80冰箱冻存。同时取左肾组织留作病理标本，右肾组织分生标本。
5.模型的评价
5.1 血清生化指标检测：
取各时间点（0h、1h、3h、6h、12h、24h、72h)血清，检测血清BUN（尿素氮）和Scr（血肌酐）水平,评估肾功能。
5.2 肾系数检测
摘取双侧肾脏后，生理盐水冲洗，称重计算肾系数。
肾系数=双侧肾重（mg）/体重（g）
5.3病理组织学检测：
4％多聚甲醛溶液固定48h。常规组织脱水、透明、浸蜡 、包埋。石蜡切片进行HE染色和PAS染色。
对照组大鼠肾小球、 肾小管及肾间质结构基本正常。在模型组，随着再灌注时间的延长呈现不同程度的肾脏病理改变，可见肾小管上皮细胞浑浊肿胀，出现水样或空泡变性，刷状缘消失，部分肾小管上皮细胞凝固性坏死、脱落，腔内可见管型，并可见间质水肿，间质内灶性炎症细胞浸润，肾小球病变不明显。每张切片×200 倍镜下取外髓质部 10 个视野，按 0 = 正常，1 = 轻微损伤(受损肾小管< 5%) ，2= 轻度损伤(受损肾小管 5 %～25 %) ，3 = 中度损伤(受损肾小管 25 %～75 %) ，4 = 重度损伤(受损肾小管> 75 %) 作半定量分析并计算其均值，作为肾小管坏死的评分指数
5.4 细胞因子的检测
ELISA 法检测血清 TNF-α、IL-6 含量, 模型组大鼠血清 TNF- α 和 IL- 6 含量在各时间点均显著高于对照组，其中24h为最显著。
6.注意事项
6.1 分离肾脏时不要损伤肾脏及其他器官
6.2 缺血要一次成功否则会造成缺血预处理而减轻损伤
6.3 缺血和应可见肾脏先变白一段时间后变暗发紫
图1 大鼠肾脏缺血再灌注手术操作图（动脉夹夹闭两侧肾动脉，缺血60min后松开动脉夹）
其他动物疾病模型请参见：
小鼠肺栓塞模型
小鼠脑缺血模型
小鼠肾纤维化模型
小鼠乙酸诱导肠炎模型
小鼠子宫内膜异位模型
小鼠明矾OVA致哮喘模型
小鼠肝脏缺血再灌注损伤模型
小鼠肾脏缺血再灌注损伤模型
小鼠卵巢去势致骨质疏松症模型
CCl4诱导的小鼠肝脏纤维化模型
刀豆蛋白A(Con A)诱导的小鼠肝炎模型
大鼠脑缺血模型
大鼠肾纤维化模型
大鼠深静脉血栓模型
大鼠乙酸诱导肠炎模型
STZ诱导的大鼠糖尿病模型
佐剂诱导的大鼠关节炎模型
大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型
大鼠肾脏缺血再灌注损伤模型
脂多糖（LPS）诱导的大鼠肺炎模型
如需更多疾病模型构建、动物实验服务、整体实验外包，请联系：cto@cloud-clone.com 或 027-84856562
