货号: | IS006 |
供应商: | 武汉优尔生商贸有限公司 |
数量: | 现货 |
英文名: | Protein A/G Purification Column Offer |
保质期: | 1年 |
保存条件: | 经常使用4℃保存,长期保存加甘油放置于-20℃ |
规格: | 1 kit |
温馨提示:仅供体外研究使用,不用于临床诊断!
[关联信息]
蛋白A(Staphylococcal Protein A)是一种金黄色葡萄球菌细胞壁蛋白质,能与哺乳动物IgG的Fc区结合。采用重组表达的Protein A,将Protein A与溴化氢活化的颗粒状琼脂糖凝胶偶联制成Protein A预装柱,能够特异性地结合多种免疫球蛋白的Fc区段。
Protein A预装柱可用来纯化不同来源的抗体及不同亚型的抗体,并在免疫共沉淀实验中捕获免疫复合物。本产品使用了多位点交联技术,稳定性好、特异性高并具有广谱结合力,每毫升基质可特异性结合5-10毫克抗体。
[产品组分]
名称 规格
Protein A预装柱 5ml
产品说明书 1份
[保存条件]
经常使用4℃保存,长期保存加甘油放置于-20℃,有效期一年。
[运输条件]
低温冷藏运输
[注意事项]
抗体纯化柱可以多次反复使用,但应当避免同一支纯化柱纯化不同的抗体,因为抗体和柱子之间结合紧密,酸洗脱并不能完全洗去结合上的免疫球蛋白,将产生交叉反应。
[操作步骤]
1、取Protein A柱平衡至室温,用 10倍柱体积的PBS洗涤平衡层析柱;
2、含抗体的血清或其它体液高速离心后,将上清与等体积2×PBS缓冲液混合,调整pH以及离子浓度后,缓慢加入层析柱;
3、用10倍柱体积以上的PBS洗涤,至流出液无蛋白检出;
4、加入2-5倍柱体积0.1 M柠檬酸(pH 2.7)或者0.1 M甘氨酸(pH 3.0),收集洗脱液;
5、洗脱后的抗体加入饱和Na2HPO4溶液进行中和;
6、浓缩洗脱液到所需体积,加入50%甘油-20℃保存;
7、层析柱中Protein A柱使用后需要及时处理,酸洗脱抗体以后,使用10倍柱体积PBS洗柱平衡到中性,20%乙醇溶液充分洗涤后,封闭上下两端,保存在4℃。