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SunBio Trans-EZ病毒载体制备转染试剂

产品价格: ¥1260.00

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暂无
所在地区:
中国上海
有效期至:
长期有效
最后更新:
2021-05-29 01:30:05
浏览次数:
45

产品详情

品牌名称:
SUNBIO
货号: STP07009
供应商: SUNBIO
数量: 大量现货
规格: 1.0ml

 SunBio Trans-EZ病毒载体制备转染试剂,适用于大多数产毒细胞系(株)的基因转染。在最佳实验条件下,转染后细胞的存活率高达90%以上,转染效率高于其他类型的转染试剂。特点:1.病毒载体的滴度高;2.细胞毒性低;3.生物稳定性高;4.适用范围广泛。

 

转染概要


1.细胞状态很大程度上影响了转染效率,推荐使用低代次细胞,并保证细胞状态良好。
2.为优化转染条件,推荐使用Opti-MEM培养基制备转染试剂和质粒复合物;如果没有准备Opti-MEM培养基则用无血清培养基代替。
3.质粒的抽提质量对转染的效果有很大的影响,建议使用高质量无内毒素抽提的超纯质粒,其螺旋质粒含量大于80%,OD260/OD280>1.8。


 

转染流程

下述步骤是以10 cm细胞培养器皿质粒转染为例,说明转染步骤及所需注意事项,在其他规格的培养器皿上操作时,按底面积大小等比扩大或缩小转染体系。
1. 转染前一天,将细胞接种10 cm细胞培养器皿中,控制细胞转染时的密度为70-90%。
2. 转染前一小时取出细胞培养器皿,去除原有细胞培养基,加入10 ml的Opti-MEM培养基,将细胞送回培养箱。
3. 制备转染试剂和质粒的复合物:
a. 取1.5 ml Ep管一支,加入待转染的几种病毒载体质粒,用Opti-MEM培养基补齐到500 μl,轻轻混匀;
b. 取1.5 ml Ep管一支,加入35 μl Trans-EZ溶液,用Opti-MEM培养基补齐到500 μl,轻轻混匀;
c. 将Trans-EZ稀释液滴加到质粒稀释液中,边加边轻轻混匀后在室温放置20分钟,使DNA和Trans-EZ充分结合形成稳定的转染复合体。
4.取出细胞培养板,将步骤3得到的DNA-Trans-EZ复合体加入到细胞培养器皿中,做好标记,放回培养箱。
5. 4-6小时后,除去细胞上清,更换为15 ml正常完全培养基继续培养进行后续实验。

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