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ATCC CRL-2316(HCC202)
IMR-90(人胚肺成纤维细胞)
HAN人羊膜细胞
[VIP第1年] 指数:3
通过自由贸易试验区市场监管局认证 
CCK-8 细胞增殖与活性
siRNA转染试剂
干细胞通路调节化合物
RNA干扰载体shRNA质粒
SunBio Am-Blue 细胞
SunBio Trans-EZ病毒| 货号： | STP07006 |
| 数量： | 大量 |
| 供应商： | SUNBIO |
| 规格： | 1.0ml |
| SunBioTM Trans-EZ 常见细胞系转染试剂说明书 |
Caralog NO.STP07006 产品规格：1 ml/支
试剂保存：4℃保存，请勿冷冻
产品介绍
SunBio Trans-EZ产品适用于绝大多数常见细胞系（株）的基因转染，在最佳实验条件下，转染后细胞的存活率高达90%以上，转染效率高于其他类型的转染试剂。特点：1.转染效率高； 2.细胞毒性低；3.生物稳定性高；4.适用范围广泛；5.不受有无血清及抗生素的影响；6.操作简单，无需更换培养基。
转染概要
1. 细胞状态很大程度上影响了转染效率，推荐使用低代次细胞，并保证细胞状态良好；
2. 为优化转染条件，推荐使用Opti-MEM培养基制备转染试剂和质粒复合物；如果没有准备Opti-MEM培养基则用无血清培养基代替；
3. 为起始优化转染条件，转染细胞时可以分别用1/2、2/2、3/2、4/2、5/2转染试剂（µl）和质粒的比例（µg）分别转染；
4. 为增加实验的准确性和减少检测的误差，建议进行三个平行孔实验；
5.质粒的抽提质量对转染的效果有很大的影响，建议使用高质量无内毒素抽提的超纯质粒，其螺旋质粒含量大于80%，OD260/OD280>1.8。
转染流程
1. 转染前一天，将细胞悬液接种到孔板中，控制细胞转染时的汇合率为70-90%。
2. 制备转染试剂和质粒的复合物：
a．取待转染质粒，用Opti-MEM培养基轻轻混匀；
b．取Trans-EZ转染试剂，用Opti-MEM培养基轻轻混匀；
c．将Trans-EZ稀释液滴加到质粒稀释液中，边加边轻轻混匀，在室温放置20分钟，使DNA和Trans-EZ充分结合形成稳定的转染复合体。
3. 取出细胞培养板，将步骤2得到的DNA-Trans-EZ复合体加入到接种好的细胞中，前后轻轻推摇孔板使混合均匀，做好标记，放回培养箱。
4. 转染24-48小时后，观察质粒荧光转染效果，或者检测Luciferase酶活性，或者收取总蛋白做WesternBlot/RT-PCR等检测。
转染系数参考
| 培养板型号 | 每孔平均底面积 | 铺板细胞悬液体积 | DNA和稀释液总体积 | Trans-EZ和稀释液总体积 |
| 96-well | 0.3 cm2 | 100 μl | 0.4-0.6μg in 7.5 μl | 0.2-1μl in 7.5 μl |
| 24-well | 2 cm2 | 500 μl | 0.8-1.2μg in 30 μl | 1-2.5μl in 30 μl |
| 12-well | 4 cm2 | 1 ml | 1.8-2.5μg in 50μl | 2-4μl in 50 μl |
| 6-well | 10 cm2 | 2 ml | 3.5-5 μg in 100 μl | 4-8μl in100μl |
| 60-mm | 20 cm2 | 5 ml | 8-10 μg in300 μl | 8-20μl in300 μl |
| 10-cm | 60 cm2 | 15 ml | 24-28μg in 800 μl | 20-60μl in800 μl |
