服务名称: | RNA干扰载体shRNA质粒构建 |
生博采用U6或H1启动子的shRNA表达载体,可以在细胞内直接转录出siRNA,行使其RNAi功能,GFP可以监测转染效率,抗性基因可以用于药物压力下细胞稳定株筛选,能够解决siRNA干扰时间短的缺点。同时提供用于RNA干扰实验的腺病毒载体 (Adenoviral vector)和慢病毒载体(Lentiviral vector)病毒型载体构建服务。我们根据客户提供的基因ID设计3到4个siRNA靶点并安排引物合成。把单链的引物退火成双链oligo序列,连接入双酶切线性化的RNA干扰载体,测序验证正确的shRNA干扰载体,进行高纯度质粒抽提。shRNA干扰载体后续可以进行转染实验,病毒包装实验,稳定株筛选实验等。
服务流程图
实验流程图
报价与周期
参考文献
[1] SUi G,Soohoo C,Affar el B,et al. A DNA vector-based RNAi technology to suppress gene expression in mammalian cells.Proc.Natl Acad Sci USA,2002, 99(8):5515-5520.
[2] PAddison PJ,Caudy AA,Hannon GJ. Stable suppression of gene expression by RNAi in mammalian cells[J].Proc Natl Acad Sci USA,2002,99(3):1443-1448.
[3] BRummelkamp TR,Bernards R,Agami R. A system for stable expression of short interfering RNAs in mammalian cells[J].Science,2002,296(5567):550-553.
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用于RNA干扰的常规质粒载体
用于RNA干扰的慢病毒载体
用于RNA干扰的腺病毒载体
载体图谱说明
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上海生博同时提供国际著名公司如下常用病毒载体系统的载体构建和病毒包装服务