货号: | TD605-50 |
英文名: | TIANMO BIOTECH |
保质期: | 1年 |
保存条件: | 常温 |
规格: | 50次 |
细菌/真菌DNA小量提取试剂盒
Catalog No. TD605-50 (50次反应)
Highlights
- 可在15分钟内快速从真菌,细菌等样品中提取到微生物的基因组DNA。
- 获得的基因组DNA产量高、纯度好,可以直接用于酶切、PCR、测序等分子生物学实验。
- 无需使用有机变性剂和蛋白酶K。
- 此产品仅供科研使用。
产品组成:
试剂盒组成 | 保存 | 50次 | |
裂解管 | 室温 | 50个 | |
裂解液 | 室温 | 40 ml | |
基因组DNA裂解液 | 室温 | 100ml | |
基因组DNA洗涤液1 | 室温 | 30 ml | |
基因组DNA洗涤液2 | 室温 | 50 ml | |
过滤柱(桔色盖) | 室温 | 50个 | |
基因组DNA洗脱液 | 室温 | 20 ml | |
2号柱 收集管(2ml) | 室温 | 50个 | |
室温 | 200个 |
Note –售出后一年内产品质量是可以保证。 试剂已经过大量的常规检测来保证其可操作性。此产品仅供研究并且需要由专业人员来使用。
试剂盒中的部分试剂是有刺激性的。 请带好手套和防护眼镜。
注意事项:
- 环境温度低时基因组DNA裂解液或者基因组DNA洗涤液1可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
- 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
特性:
- 样品:可有效的从50-100mg(湿重)以内的真菌或者细菌中提取到RNA。等同于大约109细菌细胞或者108酵母细胞。
- DNA 纯度: 获得的基因组DNA产量高、纯度好, 可以直接用PCR,高通量测序等各种分子生物学实验。
- 基因组DNA大小: 一般经过震荡后,可回收到40 kb大小左右的基因组DNA。如果样品中含有病毒DNA或者线粒体DNA的化也会一起回收到。
- 基因组DNA回收情况: 可从100µl (最少35µl)洗脱液中可回收到25µg左右的基因组DNA。
- 操作温度: 室温 (15-30°C)。
可选步骤:添加β巯基乙醇到DNA结合液中,终浓度为0.5% 例如:500ul到100ml的基因组DNA裂解液中。
- 将已重悬在纯净水或者缓冲液(例如PBS)中约50-100mg(湿重)的真菌或细菌细胞添加到裂解管中,然后添加750ul的裂解液到裂解管中,在涡旋仪上最大速下振荡5分钟以上混匀。(如果使用高频振荡器时间可以适当缩短)
- 将裂解管在10,000 x g的离心力下离心1分钟。
- 首先把过滤柱(桔色盖)的下端拧断并套在一个收集管中。然后将上一步所得上清(约400μl)加到过滤柱中,在8,000 x g的离心力下离心1分钟。丢弃过滤柱。
- 添加1200μl的基因组DNA裂解液到上一步的收集管中充分混匀。
- 将2号柱套在一个新的收集管里。
- 从步骤4中吸取800μl混合液加到2号柱中,在10,000 x g下离心1分钟,倒掉收集管中废液。
- 重复步骤6。
- 2号柱套在一个新的收集管内,添加200μl的基因组DNA洗涤液1到2号柱中,在≥10,000 x g下离心1分钟。 无需倒掉收集管中的废液,即可直接进行下一步。
- 添加500μl的基因组DNA洗涤液2到2号柱中,在≥10,000 x g下离心1分钟。
将2号柱移至干净的1.5ml离心管中直接添加100μl的基因组DNA洗脱液到柱基质上(洗脱液事先在 65-70℃水浴中预热效果更好),室温下放置2-5分钟,在≥1,000 x g下离心1分钟来洗脱基因组DNA。