货号: | TD403-50 |
供应商: | 天漠科技 |
英文名: | TIANMO BIOTECH |
保质期: | 1年 |
保存条件: | 常温 |
规格: | 50次 |
DNA纯化浓缩试剂盒-5
Catalog No. TD413-50 (50次反应) TD413-200 (200次反应)
Highlights
- 快速 (2 分钟) 回收到来自PCR、内切酶消化、PCR,细胞溶解产物等的超纯DNA。对于 post-RT cDNA的纯化和M13噬菌体中待测序DNA的纯化是非常理想的。
- 柱的设计可使 DNA在少量体积的水或缓冲液中洗脱并且达到很高的浓度。
- 洗脱的DNA 尤其适用于 PCR, DNA 测序, DNA 连接, 内切酶消化, RNA 转录, 放射性标记, 等。
组件名称 | 规格(50次反应) 规格(200次反应) | 保存温度 |
DNA 结合液 | 50 ml 2x100 ml | 常温 |
DNA 洗涤液 | 10 ml 40 ml | 常温 |
DNA洗脱液 | 1 ml 4 ml | 常温 |
1号柱 | 50个/包 200个/包 | 常温 |
收集管 | 50个/包 200个/包 | 常温 |
- 此产品仅供科研使用。
Note –售出后一年内产品质量是可以保证。 试剂已经过大量的常规检测来保证其可操作性。此产品仅供研究并且需要由专业人员来使用。试剂盒中的部分试剂是有刺激性的。 请带好手套和防护眼镜。
Version。 1.0.2
特性
- DNA 纯度 – 在水中洗脱到的高质量、纯化到的 DNA尤其适用于 DNA 测序, DNA 连接, 内切酶消化.
- DNA 大小 –50 bp 到23 kb之间
- DNA 回收率 –一般的,可在10 µl的水中洗脱出5 µg的 DNA。对于从50bp到5kb的DNA,回收率为90-95%
- 样品来源 – DNA 来自 PCR, 限制性内切酶消化,等分子生物学实验.
试剂制备
DNA洗涤液 在使用之前一定要配好,添加好乙醇后在试剂瓶上做好标记!!!
试用装的DNA洗涤液 已经添加乙醇无需添加。
50次反应的DNA洗涤液 应添加40 ml 100%的乙醇到10ml的DNA洗涤液中。
200次反应的DNA洗涤液应添加160ml 100%的乙醇到40ml的DNA 洗涤液中。
注意事项
- 所有的溶液应该是澄清的,如果环境温度低时溶液可能形成沉淀,此时不应该直接使用,可在37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清。使用前应该恢复到室温
- 储存于低温(4℃或者-20℃)会造成溶液沉淀,影响使用效果,因此运输和储存均在室温下(15℃-25℃)进行。
- 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
- 结合液中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要立即用大量清水或者生理盐水冲洗。
操作步骤
以下离心力均在10,000-16,000 x g范围内进行
- 在一个 1.5 ml 小型离心管中, 添加2 -7倍体积的 DNA 结合液 到每1体积的 DNA 样品中. 混匀.
Application | DNA结合液 : 样品 | Example |
质粒, 基因组 DNA (>2 kb) | 2 : 1 | 200 µl : 100 µl |
PCR, cDNA, DNA片段 | 5 : 1 | 500 µl : 100 µl |
ssDNA (e.g., M13 phage) | 7 : 1 | 700 µl : 100 µl |
Example: 每100μl PCR扩增后体系或者酶切后体系100μl,然后添加500 µl的DNA结合液
(如果初始体系小于100μl,请事先用双蒸水调整至100μl)
Note: 柱所能容纳的样品体积为 800 µl. 所以, 如果样品体积超过800 µl时,柱就要被多次填充和离心.
- 将混合物移置到 1号柱中并套在收集管内 .
- 离心1分钟. 去除滤出液.
- 添加 200 µl DNA洗涤液 到柱中. 离心 1分钟.
- 重复步骤4.
- 空转2分钟以去除残留的乙醇,以免抑制下游反应。(可选步骤)
- 直接添加 10 µl (或更多) 的DNA洗脱液到柱基质中. 将柱移置到 1.5 ml 小型离心管内离心1分钟来洗脱 DNA.
Note: 从柱中洗脱出的DNA 产量与pH 和温度有关. 如果使用水洗脱, 确保 pH 是 >7.5. 在向柱中加入水后静置1分钟可增加较大 (> 6 kb) DNA的产量.在 60-70oC 的水中洗脱DNA可增加较大DNA (> 10 kb)的产量
Note: 如果试验需要的话 TE 缓冲液 (10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 8.0)