货号: | TD407- 50 |
供应商: | 天漠科技 |
英文名: | TIANMO BIOTECH |
保质期: | 1年 |
保存条件: | 室温 |
规格: | 50次 |
琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒
Catalog No. TD407- 10 (10次反应) TD407-50 (50次反应)
TD407-100 (100次反应) TD407-200 (200次反应)
特点
- 可在10 µl 的少量水中回收到超纯的DNA,并且对于一系列下游的分子生物实验非常理想.
- 此过程与 TAE 或者 TBE缓冲的凝胶是兼容的. 无需像其它试剂盒那样调整 pH.
- 切下范围在75bp到10kb之间的DNA回收率为95%. 并且不会发生像常在玻璃奶和基于阳粒子树脂过程中的DNA切变现象.
- 本产品仅供科研使用
组件名称 | 规格(50次反应) 规格(200次反应) | 保存温度 |
溶胶液 | 50 ml 2 X100 ml | 常温 |
DNA 洗涤液 | 6 ml 24 ml | 常温 |
DNA 洗脱液 | 1 ml 4 ml | 常温 |
1号柱 | 50个 200个 | 常温 |
收集管 | 50个 200个 | 常温 |
试剂盒中的部分试剂是有刺激性的。 请带好手套和防护眼镜。
Ver.1.0.6
试剂制备
DNA洗涤液 在使用之前一定要配好,添加好乙醇后在试剂瓶上做好标记!!!
10次反应的DNA洗涤液 已经添加乙醇无需添加。
50次反应的DNA洗涤液 应添加24 ml 100%的乙醇到6ml的DNA洗涤液中。
100次反应的DNA洗涤液 应添加48 ml 100%的乙醇到12ml的DNA洗涤液中。
200次反应的DNA洗涤液应添加96 ml 100%的乙醇到24ml的DNA 洗涤液中。
特性
- DNA 纯度 – 在水中洗脱的高质量、纯化的 DNA尤其适用于DNA 测序, DNA 连接, 限制性内切酶消化, DNA放射性标记等分子生物学实验。
- DNA 大小 –50 bp 到23 kb之间。
- DNA 回收率 –一般的,可在10 µl的水中洗脱出5 µg的 DNA。对于从50bp到10kb的DNA,回收率为70-90%,从11kb到23kb的DNA,回收率为50-70%
- 样品来源 –来自 PCR, 限制性内切酶消化, 质粒抽提, 激酶反应,等的DNA和在TAE 或TBE缓冲的 琼脂糖凝胶切片中的DNA。
特点
- 使用了优质溶胶液,不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
- 溶胶液调制成为了黄颜色,便于观察溶胶效果和监测pH值变化从而达到最佳结合效果,大大提高回收效率。
- 改进的溶胶液配方,大大提高了缓冲能力和稳定性,即使样品变化很大也能将PH缓冲在最佳结合范围内。
- 快速、方便,不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀。
- pH值≤7.5时,吸附膜吸附DNA的效率最高。如果切下来的凝胶中含有电泳缓冲液太多,造成溶胶后溶胶液pH偏高,会导致回收率降低。
操作方案
以下离心操作步骤的离心力均在10,000 - 16,000 x g之间进行。
- 使用刀片或手术刀把DNA片段从琼脂糖凝胶上切除下来并且移置到 1.5 ml 小型离心管内.
- 将 3 倍体积的 溶胶液 添加到每1体积从凝胶上切下的琼脂糖切块中.
- 在 37-55°C 下温水浴 10 分钟直到凝胶切块完全溶解.
- 将溶解的琼脂糖切块溶液放到 1号柱 中并把柱套在 收集管 里.
- 离心1分钟. 去除滤出液.
- 添加 200 µl 的 DNA 洗涤液 到柱中离心1分钟,去除滤出液.
- 重复第6步洗涤步骤.
- 可选步骤:将收集管中的废液倒掉,并将1号柱套回收集管中额外离心2分钟,尽量除去洗涤液, 以免洗涤液中残留乙醇抑制下游反应。
- 直接添加 10 µl DNA洗脱液到柱基质中. 将柱套在 1.5 ml 离心管中离心1分钟来洗脱 DNA.
Note: 如果试验需要的话 TE 缓冲液 (10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 8.0) 或改进的 TE (10 mM Tris-HCl, 0.1 mM EDTA, pH 8.5) 也可用来洗脱.
在水中得到的超纯DNA可进行后续试验.