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大鼠心肌营养素1ELISAKit,大鼠(CT-1)E
小鼠内脂素/内脏脂肪素(VF)ELISA试剂
人抗流行性出血热病毒抗体IgG (EHF)EL
通过丰台分局认证 
SYBR GreenⅠ
Geneshow 核酸染料 （
Genecolour II TM 核
Genecolour II 核酸染
SYBR GreenⅠ（荧光PC
Genecolour I 核酸染
TransMax DNA 转染试| 货号： | GB-2 |
| 供应商： | 北京金博益生物技术有限公司 |
| 数量： | 23 |
| 规格： | 32孔/32孔 |
用途：
本试剂盒采用ELISA法可定性、定量检测P24抗原，适用于血清、血浆及HIV培养上清标本，仅限于HIV辅助诊断和实验室研究。
测定原理：
本试剂盒采用双抗体夹心法测P24抗原，即将抗P24的单克隆抗体包被于微孔板，待测样本加入已包被的反应孔内孵育，若标本中含有HIV-1p24抗原，则该抗原与孔内的抗体形成抗原抗体复合物，加入酶标抗HIV-1p24单抗，孵育后，酶标抗体与抗原抗体复合物上的抗原结合，再与底物反应显色。最后用硫酸终止反应，用酶标仪测定OD值，确定反应的阴阳性。
试剂盒组成：
1、微孔反应板 8孔×12 3、阴性对照 6ml 5、酶结合物 13 ml 7、显色剂 7ml 9、终止液 6ml
2、裂解液 3.5ml 4、阳性对照 1ml 6、20倍浓缩洗涤液 50ml 8、底物液 7ml
测定步骤：
1、配液：将50 ml浓缩洗涤液（20倍）用蒸馏水稀释至1000 ml。
2、定量P24系列稀释：阳性对照（PC）含有320pg/ml的重组P24抗原，用阴性对照(NC)倍比系列稀释五个浓度的阳性对照（稀释方法见下表），如果定量测定的样品为细胞培养上清液，则需用未感染的细胞培养上清液进行系列稀释抗原，每个稀释浓度做两个复孔。
表1
3、编号：将样品对应孔按序编号，每板应设阴性对照3孔、阳性对照两孔、空白 1孔，如果测定样品为细胞培养上清液 ，则需用未感染的细胞培养上清液做阴性对照3孔。
4、每个反应孔中加入25μl裂解液。
5、将100μl待测样品或对照品加入到有裂解液的反应孔中，振荡30-60秒混匀，置37℃孵育1小时。
6、洗板5次，拍干后每孔加入酶结合物125μl/孔（空白孔不加），置37℃孵育45分钟。
7、洗板5次，拍干后每孔加入底物（底物液：显色液=1：1混合）125μl/孔。置37℃孵育15—30分钟。
8、加入终止液50μl/孔。
9、用酶标仪读数，波长450nm(建议使用双波长酶标仪，参考波长630nm)。
结果判定：
1、阴性对照的正常范围：正常情况下，阴性对照OD值应≤0.150。
2、阳性对照的正常范围：正常情况下定性测定(160pg/ml) 阳性对照OD值≥1.000；定量测定80 pg/ml阳性对照OD值≥0.650
3、临界值计算：测定样品为血清或血浆时临界值=阴性对照平均值+0.071；测定样品为细胞培养上清液则临界值=细胞培养上清液阴性对照平均值+0.071
4、阳性定性判定：测试标本的OD值小于临界值则为阴性；测试标本的OD值大于或等于临界值则为阳性。
5、阳性定量判定：参照如下图表的方法，绘出标准曲线并进行定量判定。
表2
NC1=0.033 NC2=0.032 NC3=0.034 NCx=0.033
Cut off=0.033+0.071=0.103
注意事项：
1、从冷藏环境取出的试剂盒内全部成份及待测标本应在室温平衡30分钟后方可使用，余者应及时密封保存于冰箱中，已备后用（一般不超过3天）。
2、洗涤液若出现结晶，可置37℃使之溶解后方可使用。
3、结果判定必须以酶标仪读数为准，建议使用双波长450nm/630nm检测，并在反应终止后20分钟内完成。
4、本试剂的使用单位必须是经当地卫生行政部门批准的HIV初筛实验室 。
5、检测必须符合HIV实验室管理规范和生物安全守则的规定，严格防止交叉污染。操作时须带手套、穿工作服，严格健全和执行消毒隔离制度。所有样品、洗涤液和各种废弃物都应按传染务处理，终止液为2M的硫酸，使用时必须注意安全。
6、加液时必须用加液器，并经常校对加液器的准确性。
7、洗涤时 各孔均需加满洗液，防止孔口内有游离酶存在。使用洗板机洗涤应设定30-60秒的浸泡时间。
8、操作应严格按说明书进行，不同批次试剂不得混用，封板膜为一次性用品，不能重复使用。
储存条件：2-8℃避光保存。 有效期：12个月。
