货号: | GBY-11 |
供应商: | 北京金博益生物技术有限公司 |
数量: | 100 |
保质期: | 1年 |
保存条件: | -20 |
规格: | 20次 |
Cat. nos.
M0001-010 Size: 0.2 mL Store at -20°C
M0001-075 0.5 mL
M0001-100 1.0 mL
M0001-500 5 mL
TransMax介绍
TransMax试剂的转染步骤快速简便,DNA-转染试剂的复合体可以直接加入到细胞培养基中,无论培养基中是否含有血清;转染后不需要除去TransMax试剂,无需更换培养基。
操作流程
稀释DNA以及TransMax,保温15分钟,加入培养细胞中,孵育24-96小时检测结果。下面是24孔板培养细胞详细流程和注意事项。
- 准备细胞
- 准备转染试剂
- 使用50μl无血清培养基(如Opti-MEM® I培养基)稀释0.8μg-1.0μg DNA。
- 使用前轻轻摇匀TransMax,然后取1μl-3μlTransMax用50μl Opti-MEM® I培养基稀释,室温保温5分钟。注意:在30分钟内进行下一步,如果保温时间过长,会降低转染效率。
- 混合稀释的DNA(第2步)和稀释的TransMax(第3步)。在室温保温15分钟。
注意:如果在无血清条件下转染,使用含血清的正常生长培养基进行细胞铺板。在加入复合物前移去生长培养基,替换为0.5ml无血清培养基。
在37℃,5%的CO2中保温24-48小时,无须去掉复合物或更换培养基。
在细胞中加入复合物24-96小时后,分析细胞抽提物或进行原位细胞染色,检测报告基因活性。这依赖于细胞类型和启动子活性。对稳定表达,在开始转染一天后将细胞传代至新鲜培养基中,两天后加入筛选抗生素。进行稳定表达需要数天或数周。