提供商: | Biomics Biotech |
服务名称: | 腺病毒包装 |
腺病毒包装
1 特点:
1.1 几乎可以感染所有类型的细胞。
1.2 可以获得复制缺陷型(E1和E3缺失)的腺病毒。
1.3 病毒滴度高,产生病毒经过浓缩后可以达到1012 PFU/mL,能有效地进行增殖。
1.4 腺病毒载体感染宿主的范围比较广。
1.5 感染细胞时,不整合到染色体中,不存在激活致癌基因或插入突变等危险,生物安全性高。
2原理:
腺病毒(Adenovirus,Ad)是一种无包膜的线状双链DNA病毒,其复制不依赖于宿主细胞的分裂。有近50个血清型,大多数Ad载体都是基于血清型2和5,通过转基因的方式取代E1和E3基因,降低病毒的复制能力。这些重组病毒仅在高水平表达E1和E3基因的细胞中复制,因此是一种适用于治疗的高效控制系统。
3 腺病毒包装简要流程
3.1 含有目的基因的腺病毒穿梭载体的构建和质粒纯化提取。
注:客户也可以提供构建好的重组腺病毒穿梭载体。
3.2 穿梭载体与腺病毒骨架质粒重组及鉴定。
3.3 重组腺病毒质粒的酶切线性化。
3.3 线性化的重组腺病毒质粒转染包装细胞,收获细胞以制备病毒粗提液。
3.4 腺病毒扩增并纯化。
3.5 分装,- 80 oC保存。
3.6 滴度测定及无菌检测。
4 本公司提供的最终产品包括:
4.1 腺病毒载体质粒以及测序图谱(客户提供质粒的除外)。
4.2 病毒无菌检测结果。
4.3 腺病毒储液及相应的病毒滴度。
5 我们保证:
5.1 制备的病毒颗粒携带片段的正确性(客户提供质粒的除外)。
5.2 病毒颗粒的总数和病毒滴度:如无特殊要求我们提供1mL滴度为1×1010 - 1×1012个病毒基因组/mL的病毒储液
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