货号: | P1041/P1042/P1043/P1044 |
供应商: | 东盛生物 |
数量: | 大量 |
保存条件: | -20℃保存2年。 |
规格: | 250U/1000U/3000U/18000U |
货号
P1041 | P1042 | P1043 | P1044 | |
规格 | 250U | 1000U | 3000U | 18,000U |
OptimusTM Hotstart Taq DNA聚合酶(5U/μl) | 50 μl | 200 μl | 200 μlx3 | 100 μlx36 |
10× Hotstart Buffer(Mg2+ plus) | 1.25 ml | 1.25 mlx2 | 1.25 mlx6 | 1.25 mlx36 |
6× Loading Buffer | 1 ml | 1 ml | 1 ml |
保存条件
-20℃保存2年。
产品说明
东盛Hotstart Taq DNA聚合酶是一种创新型的化学修饰热启动酶,该酶在室温下活性被完全封闭,依赖温度激活酶活性,可有效减少非特异性扩增,具有非常高的特异性。扩增片段长度可达5 kb(简单模板)。延伸速率为0.5 kb/min(70-75℃)。该酶具有5'-3'聚合酶活性,无3'-5'外切酶活性。扩增产物具有3'-dA末端。东盛Hotstart Taq DNA聚合酶采用先进的化学修饰技术生产,动物源性DNA污染为0,稳定性更强,具有抗体法热启动酶不可比拟的优势,同时,预变性时间缩短至3分钟,工作效率比大多数化学修饰法热启动酶更高,是一款非常新颖、实用的产品。
活性定义
一个活性单位(U)指用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在72℃、30 min内,摄入10 nmol全核苷酸所需的酶量。
质量控制
相关测试表明无外源核酸内切酶或核酸外切酶污染;PCR检测无宿主残余DNA,能有效特异地扩增人基因组中的单拷贝基因;室温放置一周,扩增活性无明显改变。
10× Hotstart Buffer
50 mM KCl
100 mM Tris-HCl
200 mM NH4Cl
20 mM MgCl2
酶贮存液
200 mM Tris-HCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
100 mM KCl
0.5% Tween 20
50% Glycerol
0.5% Triton X -100
应用举例
反应体系
λ DNA(2.5 ng/μl) | 1 μl |
引物1(10 μM) | 2 μl |
引物2(10 μM) | 2 μl |
10× Hotstart Buffer | 5 μl |
dNTP (2.5 mM) | 4 μl |
Hotstart Taq(5U/μl) | 0.5 - 1 μl |
超纯水 | 补足至50 μl |
反应条件
94℃ | 3 min |
94℃ | 30 sec |
55-68℃ | 30 sec |
72℃ | 1-2 min |
72℃ | 10 min |
注意事项
1 本产品采用改进的化学修饰技术,依赖温度激活DNA聚合酶,能有效抑制非特异性结合,可在室温下配置反应体系。
2 Hotstart Taq DNA聚合酶具有脱氧核苷酸转移酶活性,因此在PCR产物3'末端通常会加上1个多余的脱氧腺嘌呤核苷。
3 模板DNA推荐用量(50 μl标准PCR体系)
人类基因组DNA | 0.1-1 μg |
λ DNA | 0.5-5 ng |
质粒DNA | 0.1-10 ng |
大肠杆菌DNA | 10-100 ng |
Q&A
Hotstart Taq DNA聚合酶的特异性为何高于普通Taq DNA聚合酶?
答:Hotstart Taq DNA聚合酶是采用化学修饰技术对普通Taq DNA聚合酶进行了修饰,室温下活性被完全封闭,需要依赖温度激活DNA聚合酶。低温时酶活性被抑制,高温时酶被激活, 均在极短时间内完成。每一步反应都会有低温抑制、高温激活的效果,所以特异性更好。
Hotstart Taq DNA聚合酶的扩增产物能否直接进行TA克隆?
答:可以。