点击图片查看原图
Qiagen/凯杰765112正品试剂盒部分产品
TaqPath™ ProAmp™ Master Mix 1 x 1
LiquiChip MDD Computer
[VIP第1年] 指数:2
通过广州市天河区工商行政管理局认证 
RT- PCR kit
50 bp ladder
500 bp ladder
Optimus Hotstart Taq
TRAzol
RNA样本保存液
Oligo dT（50uM）| 货号： | R1051 |
| 数量： | 大量 |
| 供应商： | 东盛生物 |
| 保质期： | 9-12个月 |
| 保存条件： | 2-8℃避光保存 |
| 规格： | 50次 |
通用RNA提取试剂盒（离心柱型）
| 货号 | 规格 | 价格 |
| R1051 | 50次 | 650 |
产品组分
| 组分 | R1051（50 次） |
| 溶液 RL | 60 ml |
| 溶液 RPI | 18 ml |
| 溶液 RW | 12 ml |
| DEPC处理水 | 10 ml |
| RNase-free 纯化柱 | 50 个 |
| RNase-free 离心管 | 50 个 |
| RNase-free 收集管 | 50 个 |
| 说明书 | 1 份 |
需要自备的溶液
● 氯*仿
● 无水乙醇
产品说明
通用RNA提取试剂盒是经过改进开发的新一代产品，提高了裂解液的裂解能力和提取的灵敏度，同时通过可在特定适宜的条件下特异、可逆地结合RNA，而各种蛋白质和其他杂质均可被去除掉对硅基质膜的改进增强了对RNA的吸附能力，得到的RNA 纯度更好，质量更高。该试剂盒可从各种细胞或组织中快速提取总RNA，每个吸附柱每次可处理50–100 mg 组织或5×106 细胞，可同时处理大量不同样品。一个小时内即可完成反应，提取的总RNA 没有DNA 和蛋白的污染，可用于Northern blot、Dot blot、polyA 筛选、体外翻译、RNase 保护分析和分子克隆。
产品特点
- 操作简单，可在一个小时内完成实验
- 稳定的得率
- 高纯度产物，可用于多种下游实验
保存条件
2-8℃避光保存9-12个月。
注意事项-------------------------------------------------------------------------------------------------
- 严防操作环境、使用的容器、耗材和试剂的RNase污染。操作过程中勤换手套。
- 使用本产品提取的RNA一般不含有DNA污染。在极少数情况下（与组织pH值等相关），如果有DNA污染而又必须去除，则可以用RNase-free的DNase处理样品。
- 请严格遵照操作步骤操作。
- 不同起始材料试剂用量及预期RNA产率。
- RNA浓度=（OD260-OD320）稀释倍数0.04μg/μl
操作步骤-------------------------------------------------------------------------------------------------
第一次使用前应在溶液 RPI、溶液 RW中加入无水乙醇，加入量请参见瓶上标签。
1. 样品处理
a. 组织：将组织在液氮中磨碎。每 50–100 mg 组织加1 ml 溶液 RL，用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过裂解液RZ 体积的十分之一。
b. 单层培养细胞：直接在培养板中加入裂解液RZ 裂解细胞，每10 cm2 面积加1 ml溶液 RL。用取样器抽打几次。
注意：溶液 RL 的加入量根据培养瓶面积决定，不是由细胞数决定。如果加量不足，可能导致提取的RNA中有DNA污染。
c. 细胞悬液：离心取细胞，弃上清。每5–10×106 动物细胞和植物细胞加入1 ml 溶液 RL。加溶液 RL 前不要洗涤细胞，以免降解mRNA。
2. 将匀浆样品在15–30℃放置5 min，使得核酸蛋白复合物完全分离。
3. 可选步骤： 4℃ 12,000 rpm (~13,400×g) 离心5分钟，取上清，转入一个新的无RNase 的离心管中。
注意：如果样品中含有较多蛋白、脂肪、多糖或肌肉、植物结节部分等，可加此步骤离心去除。离心得到的沉淀中包括细胞外膜、多糖、高分子量DNA，RNA存在于上清
溶液中。
4. 加入200 μl 氯*仿，盖好管盖，剧烈振荡15 s，室温放置3 min。
5. 4℃ 12,000 rpm (~13,400×g) 离心10 min，样品会分成三层：黄色的有机相，中间层和无色的水相，RNA 主要在水相中，水相的体积约为所用溶液 RL试剂的60%。把水
相转移到新管中，进行下一步操作。第一次使用前应在溶液 RPI、溶液 RW中加入无水乙醇，加入量请参见瓶上标签。
6. 缓慢加入0.5 倍体积无水乙醇，混匀（此时可能会出现沉淀）。将得到溶液和沉淀一起转入纯化柱中，4℃ 12,000 rpm (~13,400×g)离心30 s，若一次不能将全部溶液和
混合物加入纯化柱，请分两次转入纯化柱中，4℃ 12,000 rpm (~13,400×g)离心30 s，弃掉收集管中的废液。
7. 向纯化柱中加入500 μl 溶液 RPI（使用前请先检查是否已加入乙醇），4℃ 12,000 rpm (~13,400×g)离心30 s，弃废液。
8. 向纯化柱中加入500 μl 溶液 RW（使用前请先检查是否已加入乙醇），室温静置2 min，4℃ 12,000 rpm (~13,400×g)离心30 s，弃废液。
9. 向纯化柱 中加入500 μl 溶液 RW，室温静置2 分钟，4℃ 12,000 rpm(~13,400×g)离心30 s，去除残余液体。
10. 将纯化柱入2ml 收集管中，4℃ 12,000 rpm (~13,400×g)离心2 min，去除残余液体。
注意：此步骤目的是将纯化柱中残余的漂洗液去除，离心后将纯化柱在室温放置片刻，或置于超净工作台上通风片刻，以充分晾干。如果有漂洗液残留，可能会影响后续
的RT等实验操作。
11. 将纯化柱转入一个新的离心管中，加30–100 μl RNase-free ddH2O，室温放置2 min，4℃ 12,000 rpm (~13,400×g)离心2 min。
洗脱缓冲液体积不应少于30 μl，体积过小影响回收效率。且RNA应保存在-70℃，以防降解。
注意：如果想提高RNA得率，可重复上步操作一次，合并两次得到的溶液。
