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脆弱的DNA分子容易受到损害,并且随着时间的推移会被不相关的DNA污染。DNA序列的标准方法是首先扩增微小的DNA样本。然而,从未经过保存的DNA样品中提取的古老的DNA 1通常难以测序,因为它已经屈服于这些侮辱。
由丹麦哥本哈根大学Ludovic Orlando领导的国际研究团队,包括沙特阿拉伯沙特国王沙特大学的Khaled Al-Rasheid,报道了古老DNA的第一个真正的单分子测序。
真正的单分子测序(tSMS)是一种绕过DNA扩增的最先进技术。它允许对单链DNA进行测序,这使得它比标准方法更快。
奥兰多和他的同事们从永久冻土中保存的马骨中采集了DNA样本超过5万年,并使用tSMS生成了115.9兆碱基。他们在基因组研究中发表了他们的发现 。
然后,该团队采用标准测序方法从相同样品中产生76.9兆碱基,并比较两种技术产生的序列。
他们证实标准方法可以从古代DNA中产生可靠的序列,但是用tSMS获得了更高的序列产量,因为这种方法特别适合于对极短片段进行测序。
研究人员对tSMS方案进行了简单的修改,使马DNA的比例增加了三倍,从而污染了DNA。
化石骨的某些部分比其他部分含有更多的DNA,并且在采集了几个不同的样本后,该团队能够识别富含DNA的利基。这可以使未来研究中更容易从化石骨骼中提取更多古老的DNA。
研究人员建议,结合标准和尖端技术,每种技术都针对单个样品的特性进行定制,这将使古代DNA样品的测序具有前所未有的准确性。
“我们可以进一步改善古代DNA的tSMS,”Ludovic说,“通过利用酶处理来获取当前协议遗漏的分子。”
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